Тех-Фибриноген-тест (100 опр.) в комплекте с контрольной плазмой
Кат. № 094
Вы можете добавить товар в корзину, указав количество
Производитель: Технология Стандарт
Вид упаковки: картонная коробка
Набор для быстрого количественного определения концентрации фибриногена в плазме крови (хронометрический метод по Клауссу) на коагулометре любой конструкции. Линейность определения от 1,0 до 6,0 г/л (без дополнительных разведений плазмы). Набор рассчитан на выполнение 100-200 анализов при расходе тромбина по 0,1-0,05 на 1 определение содержания фибриногена. Принцип метода заключается в определении времени свертывания разбавленной цитратной плазмы избытком тромбина. Время свертывания при этом пропорционально концентрации фибриногена, которую определяют по калибровочному графику. Коэффициент вариации результатов определения концентрации фибриногена не превышает 5%. Допустимый разброс результатов определения концентрации фибриногена в одной пробе плазмы разными наборами одной серии не превышает 10%
Функциональное назначение
Тех-Фибриноген-тест предназначен для быстрого количественного определения содержания фибриногена в плазме крови (хронометрическим методом по Clauss) на коагулометрах всех имеющихся конструкций (как с оптическим, так и механическим принципом регистрации результатов) за исключением автоматов, которые требуют дополнительной настройки
Технические характеристики
Состав набора:
1. Тромбин (лиофильно высушенный реагент, 500 ед. NIH) — 2 флакона.
2. Растворитель для тромбина, 10,5 мл — 1 флакон.
3. Контрольная плазма с известным содержанием фибриногена (лиофильно высушенная) на 1 мл — 1 флакон.
4. Буфер трис-НСI (концентрированный 20:1 раствор, 1 М), 10 мл — 1 флакон.
Линейность определения от 1,0 до 6,0 г/л (без дополнительных разведений плазмы).
Коэффициент вариации результатов определения концентрации фибриногена не превышает 5%.
Допустимый разброс результатов определения концентрации фибриногена в одной пробе плазмы разными наборами одной серии не превышает 10%.
Все реагенты, входящие в набор, только для применения in vitro.
Хранение набора должно проводиться при температуре +2. 8°С в течение всего срока годности набора (24 месяца). Допускается транспортировка при температуре до +25°С в течение 30 суток, не замораживать.
Время использования набора не должно превышать 1 неделю с момента вскрытия его компонентов.
Раствор тромбина можно хранить при температуре +2. 8°С не более 3 дней; не замораживать.
Растворитель для тромбина после вскрытия флакона можно хранить при температуре +2. 8°С не более 1 недели; не замораживать.
Контрольную плазму после разведения можно хранить при комнатной температуре не более 3 часов или не более 1 недели при температуре -16. -20°С.
Рабочий раствор буфера можно хранить при температуре +2. 8°С не более 1 месяца.
Документация и инструкции
Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.
На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.
© 2012-2019 Арт-Медика оборудование, реагенты, изделия медицинского назначения для клинической лабораторной диагностики
источник
Определение концентрации фибриногена
Определение концентрации фибриногена в клинической практике проводят для оценки системы гемостаза, острофазного ответа и риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. Референтный диапазон его концентрации составляет 2,0-4,0 г/л и практически не зависит от пола и возраста, а при тяжелых бактериальных инфекциях, травмах его концентрация может превышать 10 г/л.
Для количественного определения концентрации фибриногена в условиях клинико-диагностических лабораторий наиболее применим метод Клаусса в основе которого лежит логарифмическая зависимость концентрации фибриногена в разведенной исследуемой плазме от lg времени образования сгустка после добавления к плазме тромбина высокой активности.
Перед регистрацией времени образования фибринового сгустка исследуемую плазму первоначально разводят буферным раствором в 10 раз, поскольку только в условиях высокой активности тромбина и низких концентраций фибриногена наблюдается линейная зависимость концентрации от времени образования фибрина. Такое разведение плазмы крови позволяет определять концентрацию фибриногена ориентировочно в диапазоне до 5,0 г/л. Этап разведения образца плазмы может отрицательно влиять на воспроизводимость метода.
Исключение этапа предварительного разведения пробы представляется целесообразным с позиции контроля качества исследований, и реализовано в модифицированном методе Клаусса используемого новой тест-системой «МультиТех-Фибриноген» производства фирмы « Технология –Стандарт». Модифицированный метод Клаусса позволяет исследовать концентрацию фибриногена в более широком диапазоне и исключить влияние этапа разведения пробы на правильность и воспроизводимость.
Метод может быть применен для определения концентрации фибриногена на коагулометрах с оптическим, оптико-механическим и механическим принципом регистрации образования сгустка.
Ниже приводятся результаты апробации и сравнения новой тест-системы с наборами реагентов для определения концентрации фибриногена других производителей.
Принцип метода заключается в определении времени свертывания цитратной плазмы избытком тромбина. Концентрация фибриногена определяется по калибровочной кривой, построенной в билогарифмической системе координат.
Подготовка реагентов к работе и проведение исследования приведены в инструкции к набору реагентов «МультиТех-Фибриноген».
Оценка результатов: Время свертывания исследуемого образца плазмы составляет 5-100 с, в зависимости от концентрации фибриногена и типа коагулометра. Диапазон определения концентрации фибриногена без дополнительного разведения составляет 0,9-10,0 г/л. Если результаты определения близки к 0,9 г/л или меньше (отсутствие регистрации сгустка), концентрацию фибриногена следует определить классическим методом Clauss набором реагентов «Тех-фибриноген-тест» (кат. № 094 или кат. № 324) или аналогичным с разведением плазмы 1:5. Концентрация фибриногена у здоровых людей находится в диапазоне от 2,0 до 4,0 г/л.
Результаты сравнительного тестирования набора реагентов «МультиТех-Фибриноген» с близкими по назначению наборами и различных коагулометрах
Калибровка тест-системы «МультиТех-Фибриноген» выполнена на коагулометрах с разным принципом регистрации времени образования сгустка с использованием набора «МультиТех-Калибратор», состоящего из 5 лиофилизированных образцов калибровочных плазм с концентрацией фибриногена 1.25, 2.2, 3.2, 5.5, 8.0 г/л. Калибровочные кривые, построенные для разных приборов, представлены на рис. Зависимость концентрации фибриногена от времени образования сгустка в билогарифмической системе координат приближается к прямой линии на всей области тестирования.
Рис. Калибровочные кривые, полученные при использовании набора «МультиТех-Фибриноген» на разных коагулометрах
Сравнение разных тест-систем проведено с использованием контрольной плазмы с концентрациями фибриногена 0,6; 1, 1; 2,3; 3,4; 5,6; 8,4 г/л . В таблице 1 приведены данные по стабильности определения КФ в плазме крови наборами реагентов разных фирм при проведении исследования по методу Клаусса с предварительным разведением плазмы 1:10, и использовании цельной плазмы, при проведении исследования по модифицированному методу.
ВАЖНО! Применение модифицированного метода Клаусса позволяет расширить диапазон уверенного определения КФ для разных типов коагулометров, особенно в области высоких концентраций, требующих дополнительного разведения пробы при классическом варианте метода.
Таблица 1.
Результаты определения КФ тест-системами разных производителей
источник
Определение концентрации фибриногена в клинико-диагностической лаборатории
1 Определение концентрации фибриногена в клинико-диагностической лаборатории Бирюля Диана Геннадьевна ООО фирма «Технология-Стандарт»
2 Фибриноген гликопротеин плазмы крови синтезируется в печени в количестве 2-5 г в день, время его полувыведения около 4-х дней Функции: образование фибринового сгустка, заживление ран, фибринолиз, воспаление, ангиогенез, клеточное и структурное взаимодействие, неоплазия Референтные значения 2,0-4,0 г /л концентрация может увеличиться на % во время физиологического стресса
3 сложный гликопротеин, состоящий из трех пар полипептидов:α,β и ϒ полипептиды связаны друг с другом 29 дисульфидными связями
4 Клинико-диагностическое значение Гиперфибриногенемия повышение уровня фибриногена в крови. Является фактором повышенного риска развития артериальных тромбозов и инфарктов органов. Физиологическое: холодное время года, беременность, менструация, постменопауза Патологическое повышение: Реакции острой фазы (лихорадка, инфекционные болезни, воспалительные и некротические процессы; травмы, ожоги, хирургические операции). Злокачественные опухоли, метастазирование Курение Оральные контрацептивы
5 Клинико-диагностическое значение Гипофибриногенемия снижение концентрации уровня фибриногена в крови. Наследственный дефицит фибриногена (а- и дисфибриногенемия) ДВС-синдром (синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания) Гемодилюция кровезаменителями Декомпенсированные болезни печени (вирусные гепатиты, цирроз) Уменьшение содержание фибриногена плазмы до уровня ниже 1 г/л служит фактором риска появления кровотечений из сосудов внутренних органов
6 Историческая справка R. Wirchow в 1847 году предположил, что существует некий растворимый предшественник в плазме, из которого и формируется кровяной сгусток в 1859 году Deni de Commercy впервые предложил для этого предшественника термин «фибриноген» в 1876 году выделен Олафом Хаммарстен (Швеция) из плазмы лошадей В 1904 году А. Шмидт наряду с тромбином определил центральную роль F I в коагуляционном каскаде В 1909 году, фибриноген впервые был выделен в хорошо очищенном виде
7 Методы определения концентрации фибриногена в крови Нефункциональные методы: высаливания или тепловой преципитации фибриногена с последующим количественным исследованием коагулята (объемным методом, фотометрией) образование стабильного фибрина с последующим выделением и взвешиванием фотометрическое определение после растворения фибрина при помощи биуретового реактива иммунологический метод Функциональные методы определение по Клауссу с тромбином турбидиметрическая модификация c батроксобином
8 Данный этап практически невозможно сделать стандартным. Сильное отжимание сгустка — приводит к потерям фибрина Слабое отжимание — к ложному завышению уровня фибриногена Определение содержания весовым (гравиметрическим) методом по Рутберг Р.А. Принцип. Образовавшийся после свертывания плазмы крови фибрин быстро высушивается, и по весу определяют содержание фибриногена в плазме. Реактивы:1. Хлорид кальция, 5% раствор; 2. Эмульсия тканевого тромбопластина на трис-буфере, 0,05 М (или буфере Михаэлиса), рн 7,3-7,4 Материал для исследования: цитратная плазма. Ход определения: К 1,0 мл плазмы в пробирке последовательно добавляют 0,1 мл эмульсии тромбопластина (или раствор тромбина) и 0,1 мл 5% р-ра хлорида кальция. Реагенты перемешивают стеклянной палочкой. Палочку оставляют в пробирке. Смесь инкубируют в термостате с прозрачными стенками (ТПС) или на водяной бане (37 С) мин, после чего образовавшийся сгусток переносят на фильтровальную бумагу и высушивают путем сжатия и перемещения сгустка по бумаге. Сгусток фибрина взвешивают на торсионных весах. В норме масса сгустка фибрина составляет 9 18 мг. Расчет: для определения концентрации фибриногена, выраженной в г/л, массу фибрина в мг умножают на коэффициент 0,222. Фибриноген в г/л = мг фибрина 0,222 Норма в плазме: 2 4 г/л Сгусток может быть рыхлым вследствие наличия ингибиторов тромбообразования Большой объем используемой плазмы ограничивает использование в педиатрии Экономичен Данный этап практически невозможно стандартизировать! Сильное отжимание — приводит к потерям фибрина Слабое отжимание — к ложному завышению уровня фибриногена Максимальный контакт персонала с кровью
9 Иммунологические методы определения концентрации фибриногена и электрофрез иммуноферментный анализ (ELISA) радиальная иммунодиффузия иммунонефелометрии электрофорез Измерение концентрации белка, а не его функциональной активности Занимает много времени Ложные результаты при наличии ПДФ Использование моноклональных антител к разным антигенам фибриногена позволяет выявлять функциональные формы Рекомендован к использованию для оценки риска кардиоваскулярных заболеваний Fibrinogen antigen measurement is suitable for studies assessing fibrinogen as a risk factor for cardiovascular disease (Cremer et al, 1994; Sweetnam et al, 1996, 1998)
10 Определение концентрации фибриногена в протромбиновом тесте (PT derived Fibrinogen) Анализатор калибруется при исследовании протромбинового время плазмы (или серии разведений плазмы) с известной концентрацией фибриногена и построения графиков изменения оптической плотности по отношению к концентрации фибриногена в логарифмических шкалах Применение PT-Fg метода обеспечивает быстрое измерение фибриногена без каких-либо дополнительных затрат Метод применим только на автоматических анализаторах Результаты зависят от метода калибровки, типа анализатора и реагентов, и оптической прозрачности пробы Не рекомендован к применению у больных с ДВС, заболевания печени, заболевания почек, дисфибриногенемией, с высоким или низким уровнем фибриногена получавших антикоагулянты, тромболитической терапией Guidelines on fibrinogen assays British Journal of Haematology, 2003, 121, Корреляция с методом Clauss нелинейная (сигмовидная)
11 Метод Сlauss Clauss, A. (1957) Gerinnungsphysiologische schnellmethode zur bestimmung des fibrinogens. Acta Haematologica, 17, К плазме крови добавляют тромбин высокой активности и измеряют время образования сгустка. Расчет концентрации фибриногена проводят по калибровочной кривой построенной в логарифмических шкалах. Для исследования используют плазму крови разведенную буфером в 10 раз. Диапазон значений при стандартном разведении плазмы от 1 до 5 г/л Выполняется на коагулометрах с механическим и оптическим типом детекции образования сгустка Метод рекомендован для разных групп пациентов Построение калибровочных кривых позволяет адаптировать любой прибор к набору реагентов Дополнительные разведения образца необходимы если превышен диапазон линейности Малочувствителен к гепарину в терапевтических дозах и ПДФ Исследование может быть выполнено на коагулометре с любым вариантом регистрации образования сгустка
12 Классический метод Clauss ПЛАЗМА КРОВИ + БУФЕР ПЛАЗМА разведение 1:9 этап предварительного разведения плазмы ТРОМБИН Диапазон линейности метода от 1 до 5 г/л фибриногена Время образования сгустка от 4 сек иследование только на коагулометре
13 Модифицированный метод Clauss Нет этапа предварительного разведения плазмы ПЛАЗМА ТРОМБИН Диапазон линейности метода от 1 до 10 г/л фибриногена
14 Наборы реагентов модифицированного метода CLAUSS в России Барнаул
15 Калибровка 100 Время, сек 10 STart-4 CoaData KC 4D АПГ Концентрация фибриногена, г/л
источник
BioximiaForYou
Фибриноген – гликопротеид, растворимый предшественник нерастворимого фибрина.
Фибриноген синтезируется печенью в количестве 2-5 г в день, время его полувыведения из крови около 4-х дней.
Фибриноген относится к острофазным белкам, увеличивающийся в острой фазе воспаления. Повышение уровня фибриногена в острой фазе, как правило, имеет транзиторный характер в отличие от атеросклероза, при котором наблюдается устойчивое увеличение этого показателя, трудно поддающегося корреляции лекарственными препаратами.
Поскольку фибриногену принадлежит важная роль в системе свертывания крови, повышение его уровня при атеросклерозе принято рассматривать как один из патогенетических механизмов, обусловливающих повышенную свертываемость крови и нарушение регуляции тромбообразования, которое, в свою очередь, приводит к развитию инфаркта миокарда или инсульта.
Определение фибриногена в плазме крови часто используют не только при диагностике нарушений гемостаза, но и при распознавании и оценке тяжести воспалительных, иммунных и опухолевых процессах.
Гиперфибириногенемия – повышение уровня фибриногена в крови.
Является фактором повышенного риска развития артериальных тромбозов и инфарктов органов.
Физиологическое: беременность, менструация.
· Реакции острой фазы (лихорадка, инфекционные болезни, воспалительные и некротические процессы; травмы, ожоги, хирургические операции).
· Злокачественные опухоли (рак легкого)
· Болезни почек (острый и хронический пиелонефрит, гломерулонефрит; нефротический синдром)
Гипофибириногенемия – снижение концентрации уровня фибриногена в крови.
· Наследственный дефицит фибриногена (а- и гипофибриногенемия)
· ДВС-синдром (синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания)
· Состояние после кровотечения, травмы, ожога.
· Болезни печени (острая желтая атрофия печени, цирроз)
· Отравление гепатотропными ядами.
· Заболевания, сопровождающиеся поражением костного мозга (лейкозы)
· Лекарственные препараты (фенобарбитал)
Уменьшение содержание фибриногена плазмы до уровня ниже 1 г/л служит фактором риска появления кровотечений из сосудов внутренних органов.
Определение содержания фибриногена весовым (гравиметрическим) методом по Рутберг Р.А.
Принцип. Образовавшийся после свертывания плазмы крови фибрин быстро высушивается, и по весу определяют содержание фибриногена в плазме.
1. Хлорид кальция, 5% раствор;
2. Эмульсия тканевого тромбопластина на трис-буфере, 0,05 М (или буфере Михаэлиса), рН 7,3-7,4, для чего навеску сухого тромбопластина (50мг) тщательно растирают в 1,0 мл буфера. Постепенно объем смеси увеличивают добавлением буфера до 5,0 мл. Полученную эмульсию центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 мин, надосадочную жидкость отделяют и используют для анализа.. Эмульсия тромбопластина хранится при +2….+8 ° С в течение 3 суток.
Активность тромбопластина может быть в пределах 11 – 20 сек.
Материал для исследования: цитратная плазма.
К 1,0 мл плазмы в пробирке последовательно добавляют 0,1 мл эмульсии тромбопластина (или раствор тромбина) и 0,1 мл 5% р-ра хлорида кальция. Реагенты перемешивают стеклянной палочкой. Палочку оставляют в пробирке. Смесь инкубируют в термостате с прозрачными стенками (ТПС) или на водяной бане (37 ° С) 10 — 20 мин, после чего образовавшийся сгусток переносят на фильтровальную бумагу и высушивают путем сжатия и перемещения сгустка по бумаге. Такое высушивание продолжают до тех пор, пока на фильтре не перестанут определяться следы влаги в проходящем свете. Сгусток фибрина взвешивают на торсионных весах.
В норме масса сгустка фибрина составляет 9 – 18 мг.
Расчет : для определения концентрации фибриногена, выраженной в г/л, массу фибрина в мг умножают на коэффициент 0,222.
Фибриноген в г/л = мг фибрина ´ 0,222
источник