Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке крови БИЛИРУБИН ОБЩИЙ “ДДС”
Закрытого акционерного общества
по применению набора реагентов для количественного определения содержания
общего билирубина в сыворотке крови
Набор предназначен для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор выпускается в двух видах фасовки и рассчитан, соответственно, на проведение 600 или 300 определений общего билирубина при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ.
Общий билирубин (прямой и неконьюгированный) в присутствии диазотированного дихлоранилина вступает в реакцию азосочетания и образует окрашенный в красный цвет комплекс азокрасителя в кислом растворе, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию билирубина в пробе и измеряется фотометрически при длине волны 546(500-560) нм.
1. Реагент 1: раствор, содержащий 2,4-дихлоранилин, 0,75 ммоль/л; соляную кислоту, 20 ммоль/л; тезит, 15 г/л — 6 флаконов (по 100 мл) или 3 флакона (по 100 мл);
2. Реагент 2: нитрит натрия, 75 ммоль/л — 2 флакона (по 3,0 мл) или 1 флакон (3,0 мл);
3. Реагент 3: калибратор-лиофилизат билирубина (концентрация билирубина «а», мкмоль/л, в калибраторе указана на этикетке флакона) — 1 флакон (1,0 мл).
Набор обеспечивает линейную область определения концентрации билирубина в диапазоне от 4,0 до 510 мкмоль/л, отклонение от “линейности” не превышает 7%. Чувствительность определения — не более 3,0 мкмоль/л, коэффициент вариации результатов определений — не более 7%.
Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данными методами.
Нормальные величины концентрации общего билирубина в сыворотке крови человека — 8,5-20,5 мкмоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.
Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови.
Реагент 1 содержит соляную кислоту, в реагенте 2 содержится токсичный компонент нитрит натрия. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т. к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
— Спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор, длина волны 546(500-560) нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
— пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,1 и 1,0 мл;
– цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл;
— пробирки стеклянные вместимостью 3,0 – 5,0 мл;
— колба коническая вместимостью 200 мл;
— 0,9% раствор NaCI (физиологический раствор);
— перчатки резиновые или пластиковые.
Приготовление рабочего реагента. Смешать в колбе конической вместимостью 200 мл необходимые объемы реагентов 1 и 2 в соотношении 100:1, полученный реагент выдержать в темном месте при температуре +18-25°С не менее 15 мин. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8°С не более трех недель или при комнатной температуре — не более 10 суток.
Приготовление калибровочного раствора. Во флакон с реагентом 3 внести 1,0 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона растворить при осторожном перемешивании при комнатной температуре (+18-25°). Полученный калибровочный раствор содержит «а» мкмоль/л билирубина. Концентрация билирубина «а» мкмоль/л в калибраторе указана на этикетке флакона с реагентом 3.
Калибровочный раствор можно хранить в темном месте при температуре +2-8°С не более суток.
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
источник
Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке крови
по применению набора реагентов для количественного определения содержания
общего билирубина в сыворотке крови
Набор предназначен для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор выпускается в двух видах фасовки и рассчитан, соответственно, на проведение 600 или 300 определений общего билирубина при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ.
Общий билирубин (прямой и неконьюгированный) в присутствии диазотированного дихлоранилина вступает в реакцию азосочетания и образует окрашенный в красный цвет комплекс азокрасителя в кислом растворе, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию билирубина в пробе и измеряется фотометрически при длине волны 546(500-560) нм.
1. Реагент 1: раствор, содержащий 2,4-дихлоранилин, 0,75 ммоль/л; соляную кислоту, 20 ммоль/л; тезит, 15 г/л — 6 флаконов (по 100 мл) или 3 флакона (по 100 мл);
2. Реагент 2: нитрит натрия, 75 ммоль/л — 2 флакона (по 3,0 мл) или 1 флакон (3,0 мл);
3. Реагент 3: калибратор-лиофилизат билирубина (концентрация билирубина «а», мкмоль/л, в калибраторе указана на этикетке флакона) — 1 флакон (1,0 мл).
Набор обеспечивает линейную область определения концентрации билирубина в диапазоне от 4,0 до 510 мкмоль/л, отклонение от “линейности” не превышает 7%. Чувствительность определения — не более 3,0 мкмоль/л, коэффициент вариации результатов определений — не более 7%.
Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данными методами.
Нормальные величины концентрации общего билирубина в сыворотке крови человека — 8,5-20,5 мкмоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.
Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови.
Реагент 1 содержит соляную кислоту, в реагенте 2 содержится токсичный компонент нитрит натрия. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т. к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
— Спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор, длина волны 546(500-560) нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
— пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,1 и 1,0 мл;
– цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл;
— пробирки стеклянные вместимостью 3,0 – 5,0 мл;
— колба коническая вместимостью 200 мл;
— 0,9% раствор NaCI (физиологический раствор);
— перчатки резиновые или пластиковые.
Приготовление рабочего реагента. Смешать в колбе конической вместимостью 200 мл необходимые объемы реагентов 1 и 2 в соотношении 100:1, полученный реагент выдержать в темном месте при температуре +18-25°С не менее 15 мин. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8°С не более трех недель или при комнатной температуре — не более 10 суток.
Приготовление калибровочного раствора. Во флакон с реагентом 3 внести 1,0 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона растворить при осторожном перемешивании при комнатной температуре (+18-25°). Полученный калибровочный раствор содержит «а» мкмоль/л билирубина. Концентрация билирубина «а» мкмоль/л в калибраторе указана на этикетке флакона с реагентом 3.
Калибровочный раствор можно хранить в темном месте при температуре +2-8°С не более суток.
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
источник
Реагенты линии ДДС для полуавтоматических биохимических анализаторов
Диагностические наборы линии ДДС специально разработаны для простых (программируемых) фотометров, фотометров с проточной кюветой и полуавтоматических биохимических анализаторов, таких как Clima MC-15, Clima Plus, StatFax 1904, BS-3000 P, Rayto 1904C, Humalyzer 2000 и др. с учетом особенностей выполнения анализов на данных приборах.
Достоинствами жидких реагентов линии ДДС являются не только их низкая стоимость, но и высокая стабильность вплоть до окончания срока годности, экономичность в использовании и уверенность в результатах анализов.
Использование наборов линии ДДС полностью исключает ошибки, связанные с качеством воды и мерной посуды, поскольку в их составе нет лиофилизированных компонентов.
Реагенты линии ДДС рекомендованы для ручных фотометров и полуавтоматов, поскольку:
- все реагенты линии «ДДС» жидкие и готовы к использованию, не требуют предварительной подготовки, как в случае использования лиофилизированных реагентов. Это позволяет экономить время на выполнение анализа;
- все методики выполняются в формате монореагентов, которые получаются при смешивании реагента 1 и реагента 2 в соотношении 41. Такая схема более удобна, менее трудоемка и требует меньше времени на выполнение анализа на ручных фотометрах и полуавтоматах;
- рабочие реагенты характеризуются высокой стабильностью после смешивания (от нескольких дней до нескольких месяцев), их можно хранить и использовать в течение указанного времени;
- при разработке реагентов используются методики, которые применяются только для данных типов приборов и не подходят для автоматических анализаторов (АЛТ КТ, АСТ КТ, Креатинин КТ, Мочевина КТ, ОЖСС);
- аналитические характеристики реагентов гарантируют качество измерений параметров на ручных фотометрах и полуавтоматах.
В рамках реализации приоритетного Национального Проекта «Здоровье» компания «ДИАКОН» поставляла реагенты линии ДДС для полуавтоматического биохимического анализатора Clima MC-15.
Данный анализатор продается на рынке более 10 лет и пользуется заслуженной популярностью в лабораториях России.
Диагностические реагенты линии ДДС полностью адаптированы для работы на анализаторе Clima MC-15. Эти реагенты имеют хорошую стабильность при работе в режиме произвольного доступа и профильном режиме. Они также содержат детергенты, которые усиливают перемешивание и предотвращают окрашивание кювет. Кроме того, из состава наборов ДДС удалены те детергенты, которые при взаимодействии с пластиком способствуют попаданию реакционной смеси в отделение для сыворотки до начала биохимической реакции, тем самым приводя к получению некорректных результатов.
Хорошие аналитические характеристики реагентов (высокая чувствительность, широкий диапазон измерения, низкие интерференции со стороны компонентов сыворотки) гарантируют качество и точность измерения параметров в 15-кюветном треке. Так, например, аналитические характеристики и состав набора для определения креатинина позволяют получить корректный результат во всех 15 кюветах, в то время как реагенты, разработанные без учета этих особенностей, могут давать разницу в 15–20% между измерением в 1-ой и 15-ой кювете.
Специально для анализатора Clima MC-15 были разработаны имунотурбидиметрические наборы для определения специфических белков в качестве современной альтернативы полуколичественному методу латексной агглютинации:
- С-реактивный белок Иммуноглобулин А
- Антистрептолизин (О) Иммуноглобулин G
- Ревматоидный фактор Иммуноглобулин М
Преимущества иммунотурбидиметрических линии ДДС:
- Жидкие реагенты, готовые к употреблению.
- Полностью количественное определение параметров.
- Четко различимые при измерении нормальный и патологический уровни маркеров в отличие от латексных тестов.
- Наличие в наборе калибратора с высоким уровнем.
- Широкий диапазон и высокая точность измерения.
- Простота использования.
- Быстрое получение результатов (10–15 мин).
- Стабильность калибровки.
- Экономный расход контрольных материалов.
источник
Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения содержания общего и прямого билирубина в сыворотке крови
по применению набора реагентов для количественного определения содержания
общего и прямого билирубина в сыворотке крови
Набор предназначен для количественного определения содержания общего и прямого (конъюгированного) билирубина в сыворотке крови человека в клинико-дигностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор выпускается в двух видах фасовки, рассчитанных на проведение 300 и 300 или 100 и 100 определений общего и прямого билирубина при расходе 1,0 мл рабочего реагента или реагента 3 на один анализ, соответственно.
Прямой (коньюгированный) билирубин взаимодействует с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием окрашенного азосоединения, интенсивность окраски которого измеряется фотометрически при длине волны 546 нм.
Общий билирубин (прямой и неконьюгированный) в присутствии диазотированного дихлоранилина вступает в реакцию азосочетания и образует окрашенный в красный цвет комплекс азокрасителя в кислом растворе, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию билирубина в пробе и измеряется фотометрически при длине волны 546 нм.
1. Реагент 1: раствор, содержащий 2,4-дихлоранилин, 0,75 ммоль/л; соляную кислоту, 20 ммоль/л; тезит, 15 г/л — 3 флакона (по 100 мл) или 1 флакон (100 мл);
2. Реагент 2: раствор нитрита натрия, 75 ммоль/л — 3 флакона (по 3,0 мл) или 1 флакон (3,0 мл);
3. Реагент 3: раствор, содержащий сульфаниловую кислоту, 29 ммоль/л; соляную кислоту, 17 ммоль/л — 3 флакона (по 100 мл) или 1 флакон (100 мл);
4. Калибратор — билирубин-лиофилизат (концентрация билирубина в калибраторе «а», мкмоль/л, указана на этикетке флакона) — 1 флакон (1,0 мл).
Набор обеспечивает линейную область определения концентрации билирубина в диапазоне от 4,0 до 510 мкмоль/л, отклонение от “линейности” не превышает 7%. Чувствительность определения — не более 3,0 мкмоль/л, коэффициент вариации результатов определений — не более 7%.
Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данным методом.
Нормальные величины концентрации билирубина в сыворотке крови человека составляют: общий билирубин — 8,5 — 20,5 мкмоль/л; прямой билирубин — 2,2 — 5,1 мкмоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.
Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови.
В реагенте 2 содержится токсичный компонент нитрит натрия, реагенты 1 и 3 содержат соляную кислоту. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т. к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
— Спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор, длина волны 546(500-560) нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
— пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02; 0,1 и 1,0 мл;
– цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл;
— пробирки стеклянные вместимостью 3,0 – 5,0 мл;
— колба коническая вместимостью 200 мл;
— 0,9% раствор NaCI (физиологический раствор);
— перчатки резиновые или пластиковые.
Приготовление рабочего реагента для определения общего билирубина. Смешать в колбе конической вместимостью 200 мл необходимые объемы реагентов 1 и 2 в соотношении 100:1, полученный реагент выдержать в темном месте при комнатной температуре (+18-25°С) не менее 15 минут. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8°С не более трех недель или при комнатной температуре — не более 10 суток.
Приготовление калибратора. Во флакон с калибратором внести 1,0 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона растворить при осторожном перемешивании при комнатной температуре (+18-25°С). Полученный калибратор содержит «а» мкмоль/л билирубина. Концентрация билирубина («а» мкмоль/л) в калибраторе указана на этикетке флакона.
Калибратор можно хранить в темном месте при температуре +2-8°С не более 1 суток.
Реагенты 2 и 3 для определения прямого билирубина готовы к использованию.
Определение общего билирубина
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице 1.
источник
Инструкция по применению Набора реагентов для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке или плазме крови человека «Общий билирубин — UTS»
по применению Набора реагентов для количественного определения содержания общего билирубина в сыворотке или плазме крови человека
Набор реагентов «ОБЩИЙ БИЛИРУБИН — UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05453
Информация для заказа набора «ОБЩИЙ БИЛИРУБИН — UTS»
Р1 80 мл + Р2 20 мл + калибратор
Р1 320 мл + Р2 80 мл + калибратор
где v – объем фотометрической ячейки анализатора.
ВНИМАНИЕ! Изменено соотношение компонентов набора. Рабочий реагент готовить смешиванием Реагента 1 (Р1) и Реагента 2 (Р2) в соотношении (4 : 1).
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «ОБЩИЙ БИЛИРУБИН — UTS» предназначен для определения содержания общего билирубина в сыворотке или плазме крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого лечения пациентов.
1.2. Билирубин является продуктом распада гемоглобина и присутствует в свободной и прямой (конъюгированной) формах в организме человека. При распаде гемоглобина первоначально образуется гидрофобный (нерастворим в воде), липофильный (жирорастворимый, токсичный) свободный билирубин, в плазме крови он присутствует в основном в комплексе «альбумин-билирубин». Далее комплекс «альбумин-билирубин» транспортируется в печень, в клетках которой свободный билирубин ферментативно связывается с глюкуроновой кислотой. В результате этого процесса (конъюгации) образуется конъюгированный (прямой) билирубин (водорастворимый и менее токсичный), который активно против градиента концентрации экскретируется в желчные ходы и в составе желчи поступает в кишечник. В норме в крови человека 75% общего билирубина приходится на долю свободного билирубина и 25% на долю прямого (связанного) билирубина.
1.3. Увеличение содержания билирубина в крови может обуславливаться многими причинами: увеличение интенсивности гемолиза эритроцитов; поражение паренхимы печени с нарушением ее билирубинвыделительной функции; нарушение оттока желчи из желчных путей в кишечник. На этом основано клиническое значение анализа [1].
1.4. Потенциальный риск применения набора – класс 2а. Основной риск косвенный и связан с возможностью получения неверного результата анализа, что может привести к неправильно поставленному диагнозу и назначению неэффективного лечения пациента. Для снижения указанного риска необходимо в каждой аналитической серии контролировать качество результатов анализов с применением контрольных сывороток в соответствии с ОСТ 91500.13..
2. ПРИНЦИП МЕТОДА
2.1. Определение общего билирубина (свободного и прямого) основано на реакции диазотирования билирубина диазосульфаниловой кислотой, в результате чего образуется соединение азобилирубин розового цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации билирубина в пробе и измеряется спектрофотометрически при нм [2,3,4]. Прямой билирубин взаимодействует с диазосульфаниловой кислотой в водной среде, в то время как свободный билирубин необходимо перевести в водорастворимую форму с помощью диметилсульфоксида.
2.2. Фотометрическое измерение основано на наличии пика поглощения с максимумом при длине волны 540 нм молекулами окрашенного азобилирубина. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет при этой длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности реакционной смеси пропорционально интенсивности окраски азобилирубина и, следовательно, прямо пропорционально концентрации общего билирубина в исследуемом образце.
3. СОСТАВ НАБОРА
3.1. Набор реагентов «ОБЩИЙ БИЛИРУБИН-UTS» поставляется в виде двух растворов Р1, Р2 и лиофилизированного калибратора.
источник