Непрямой билирубин формула расчета

Определение общего, «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови

Определение содержания билирубина в крови является важным диагностическим тестом. Билирубин обычно содержится в крови в небольших дозах (8-20 мкмоль/л), причем 75% из них составляет билирубин, связанный белками (нерастворимый) (5,7-15 мкмоль/л) и 25% «прямой» билирубин (2-5 мкмоль/л). При различных поражениях печени и желтухах часто наблюдается гипербилирубинемия, концентрация билирубина повышается.

Метод основан на колориметрическом определении интенсивности окраски продукта взаимодействия билирубина с диазореактивом. Этот продукт окрашен в малиново-красный цвет. Билирубин-диглюкоуронид реагирует с диазосмесью непосредственно. Связанный с белками билирубин реагирует с диазосмесью после диссоциации белкового комплекса, которая достигается прибавлением к сыворотке кофеинового реактива.

Алгоритм определения

В три пробирки (для общего билирубина, «прямого» и для контроля) вводят реактивы согласно таблице:

Для определения «прямого» билирубина колориметрирование следует проводить спустя 5-10 минут после добавления диазосмеси, так как при длительном стоянии в реакцию вступает «непрямой» билирубин.

Для определения общего билирубина пробу для развития окраски оставляют стоять на 20 минут, после чего колориметрируют.

При дальнейшем стоянии окраска не изменяется.

Измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр), в кювете толщиной 0,5 см против воды. Из показателей, полученных при колориметрировании общего и «прямого» билирубина, вычитают показатель контроля.

Расчет производят по калибровочному графику. Находят содержание общего и «прямого» билирубина. Для определения уровня «непрямого» билирубина вычитают из показателя общего его содержания показатель «прямого» билирубина.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Сдача сессии и защита диплома — страшная бессонница, которая потом кажется страшным сном. 9100 — | 7340 — или читать все.

источник

Определение количества билирубина

· Приготовьте пробы согласно таблице.

· Смеси аккуратно перемешать.

· Оставить стоять связанный билирубин на 10 минут, общий билирубин на 20 минут.

· Измерить оптическую плотность общего (Еобщ) и связанного (Есвяз) билирубина против раствора сравнения при длине волны 540 нм в кювете на 5 мм.

Расчетрезультатов проводим по формулам:

Ссвоб = Собщ – Ссвяз (мкмоль/л).

Норма билирубина в плазме крови:

Клинико-диагностическое значение

Определения уровня билирубина в крови.

Одним из важнейших пигментов и продуктов распада гемоглобина является билирубин. Уровень общего, прямого и связанного билирубина показывает работу печени и почек, а также уровень распада эритроцитов в крови. Определение общего билирубина и его производных в крови, моче и кале производят для дифференциальной диагностики различных видов желтух.

Общий билирубин состоит из 2 фракций:

Непрямой (свободный, комплекс с альбуминами).

Прямой (конъюгированный, связанный с глюкуроновой кислотой).

Увеличение содержания билирубина сопровождается желтушной окраской слизистых оболочек и кожных покровов. Легкая форма желтухи до 86 мкмоль/л, среднетяжелая 87-159 мкмоль/л, тяжелая 160 мкмоль/л.

Содержание непрямого (свободного) и общего билирубина в крови возрастает при:

· повышенном распаде эритроцитов (гемолитическая анемия);

· физиологической желтухе новорожденных;

· врожденных и приобретенных нарушениях превращения свободного билирубина в связанный в печени (синдром Жильберта).

Концентрация прямого (связанного) билирубина в крови увеличивается при воспалительных процессах в печени (гепатит).

Содержание прямого и общего билирубина в крови увеличивается при механической желтухе.

Содержание общего билирубина увеличивается также при приеме лекарств, увеличивающих гемолиз (н-р аспирин, тетрациклин).

Уровень прямого билирубина может увеличиваться под действием лекарств, задерживающих желчь в печени (холестаз) н-р пиницилин, эритромицин, пероральных контрацептивов, никотиновой кислоты.

Ответьте на вопросы:

1. Нарисуйте схему распада и синтеза гемоглобина.

2. Расскажите о причинах и лабораторной диагностике гемолитической желтухи.

3. Расскажите о причинах и лабораторной диагностике паренхиматозной желтухи.

4. Расскажите о причинах и лабораторной диагностике механической желтухи.

5. Какие заболевания могут сопровождаться желтухами? Почему?

Практическая работа

«Тимоловая проба».

Цели практической работы:

· закрепить знания о функциях печени;

· изучить понятие о функциональных пробах печени;

· научиться проводить и анализировать тимоловою пробу.

Задания для самостоятельной работы:

1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.

2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.

3. Выполните практическую работу.

4. Сделайте необходимые расчеты.

5. Заполните бланк анализа. Оцените полученные результаты.

6. Сделайте вывод по работе и рисунки.

7. Ответьте на дополнительные вопросы.

При взаимодействии сыворотки с тимоловым буфером появляется мутность вследствие образования комплекса «глобулин-тимол-липоид». Интенсивность помутнения зависит от количества взаимного соотношения отдельных белковых фракций.

· Провести исследование согласно таблице.

· Смеси перемешать и оставить стоять на 30 минут.

· Смеси вновь перемешать и измерить оптическую плотность опытно пробы против контроля 1.

· Если сыворотка хилезная измерить оптическую плотность пробы против контроля 2.

· Измерение проводить при длине волны 620-690 нм в кювете на 5 мм.

Расчет проводят по калибровочному графику, для постороения которого готовят серию растворов согласно таблице.

Растворы смешивают и ровно через 30 минут измеряют оптическую плотность против дистиллированной воды при длине волны 620-690 нм в кювете на 1 см. Перед измерением пробы еще раз перемешивают.

Норма тимоловой пробы 0 – 4 единиц SН (единиц помутнения Shank-Hoagland). Предельные величины – 4-5 ед.SН, патология – свыше 5 ед. SН.

· Для получения правильных результатов необходимо исключить алиментарную гиперлипидемию.

· Сыворотку хранят при температуре 21 – 27 С – несколько дней.

· При охлаждении сыворотки крови получают завышенные результаты, при более высоких температурах – заниженные.

· Результаты пробы завышаются при употреблении минеральных сульфатных вод, гемолизе, липемии, высокой билирубинемии, приеме лекарственных средств (цефалотин, индометацин, линкомицин идр.).

· Результаты пробы завышаются при анализе оксалатной плазмы, употреблении глицина, гепарина, желчные кислоты.

источник

Непрямой билирубин: что это, норма содержания в крови

Образование билирубина в организме осуществляется в результате распада гемоглобина, а именно при гемолизе эритроцитов, которые обновляются полностью каждые 110 дней. В организме может присутствовать прямой и непрямой билирубин.

Вещество имеет особый желто-оранжевый пигмент, не растворимо в воде и распространено в костном мозге, селезенке и желчи. Вывод билирубина из организма осуществляется печенью посредством мочи и кала. За это отвечает особый отдел печени, функция которого – преобразование пигмента в прямой билирубин (растворимую форму вещества) для последующего вывода вещества из организма.

В кровяном русле на постоянной основе присутствуют обе формы билирубина и при допустимой концентрации вещества в пределах нормы, здоровью человека ничего не угрожает. Отклонения уровня содержания билирубина от нормальных показателей (особенно непрямой формы вещества) могут свидетельствовать о развитии патологического процесса в организме.

Нормативное значение показателя

При отсутствии в организме заболеваний уровень непрямого билирубина в крови будет располагаться в допустимом диапазоне, который определен в соответствии с возрастом человека. На этапе новорожденности в организме здорового человека присутствует высокая концентрация билирубина, обусловленная гиперпереработкой эритроцитов.

Существует единая формула, которая используется в медицинских лабораториях для расчета показателей непрямого билирубина: из величины общего уровня вещества необходимо отнять значение прямого билирубина.

Показатели концентрации билирубина в лабораторных исследованиях соотносятся с такими границами значений:

1. Новорожденные в первые два дня жизни – max 199 мк моль/литр;
2. Младенцы в возрасте 2-6 дней — – max 207 мк моль/литр;
3. У детей старше 6 дней — max 22 мк моль/литр;
4. У взрослых мужчин и женщин – max 19 мк моль/литр.

Вышеуказанные показатели являются стандартными, рассчитанными на основе обобщенных данных. В некоторых случаях незначительные отклонения от норм могут быть нормальными для конкретного человека.

Причины повышенного билирубина

Повышен непрямой билирубин у взрослого, что это значит? Большинство случаев отклонения показателей уровня непрямого билирубина от допустимых значений свидетельствуют о развитии патологического процесса.

Чаще всего при патологических изменениях концентрации билирубина диагностируют такие болезни как:

• Недостаточность гемоглобина (анемия). Влияние данной патологии на повышение концентрации непрямого билирубина вызвано значительным разрушением красных кровяных телец (эритроцитов) для обеспечения организма дополнительным гемоглобином. Заболевание провоцирует кислородную недостаточность в органах и тканях.
• Все формы гепатита. Патологические процессы в печени существенно понижают функциональность органа, ввиду чего процесс расщепления билирубина замедляется, провоцируя скопление вещества в крови.
• Цирроз печени. Замещение здоровых клеток печени рубцовой тканью вызывает понижение эффективности деятельности органа, в том числе способности расщеплять и выводить из организма билирубин.
• Синдром Жильбера. Является врожденной патологией, вызванной генетическими особенностями, которая провоцирует ферментативную недостаточность.
• Синдром Люси-Дрискола. Заболеванию подвержены новорожденные дети в период грудного вскармливания.
• Заболевания желчного пузыря. При патологических состояниях данного органа неизбежны нарушения процесса вывода желчи из организма, что в свою очередь обязательно вызывает скопление билирубина.
• Онкологические поражения печени.
• Отдельные виды инфекционных поражений.
• Существенная потеря крови.
• Нехватка витаминов и минеральных веществ и др.

Как правило, повышенный уровень непрямого билирубина сопровождается ярко выраженными клиническими симптомами, к которым относят:

1. Желтизна эпидермиса, склер и слизистых оболочек;
2. Патологическая слабость;
3. Понижение аппетита;
4. Регулярные головные боли;
5. Приступы тошноты и рвоты;
6. Обесцвечивание фекалий;
7. Спазмы в области правого подреберья и др.

Данные проявления являются важными показателями патологий внутренних органов, которые сопутствуют различным заболеваниям.

Когда показатель непрямого билирубина понижен

Противоположные ситуации, когда наблюдается понижение концентрации непрямого билирубина в крови, встречаются достаточно редко. Кроме измененных показателей уровня билирубина, в лабораторных анализах крови выявляется недостаточное количество эритроцитов.

Наиболее распространенные патологии, сопровождающиеся понижением пигмента в крови, это:

• Все формы туберкулеза;
• Почечная недостаточность;
• Предельное истощение организма;
• Лейкоз.

Нередки случаи, когда отклонения величины уровня непрямого билирубина от нормы в анализе на биохимию являются ложными. Изменения показателей могут быть вызваны несоблюдением правил сдачи крови, соответствующих данной категории лабораторных исследований.

Кроме того, нужно придерживаться общих рекомендаций:

1. Последний перед сдачей крови прием пищи должен быть не позже, чем за 8 часов;
2. Нельзя употреблять алкоголь за несколько дней до анализа;
3. Рекомендуется избегать стрессов и сильных волнений, а также физического перенапряжения.

Профилактика

Поддерживать уровень непрямого билирубина в рамках указанных выше норм помогают следующие рекомендации:

• Полноценный сбалансированный рацион. Частые диеты для похудения и голодание может спровоцировать развитие анемии, обилие жирной пищи и переедание обеспечивает чрезмерные нагрузки на печень, вызывая различные патологии органа.
• Отказ от вредных привычек. Употребление алкогольных напитков и курение не только перегружает печень, но и значительно понижает функциональность иммунной системы.
• Поддерживать необходимый баланс витаминов и минеральных веществ.

Не стоит забывать, что лечение болезней наиболее эффективно на ранних стадиях развития патологии.

Контроль показателей крови позволит выявить отклонения от норм жизненно важных данных и ускорить постановку диагноза. Содержание непрямого билирубина в крови в слишком малых или значительно повышенных количествах может говорить о серьезных заболеваниях.

Регулярные посещения специалистов помогут не допустить развитие болезни и лечить выявленные патологии на ранних стадиях. Лечащий врач определит, как понизить непрямой билирубин на основании поставленного диагноза.

источник

Билирубин и его фракции (общий, прямой, непрямой)

Анализ, в ходе которого определяется содержание в крови желчных пигментов и их фракций. Они являются метаболитами распада гемоглобина, и их уровень повышается при усиленном разрушении эритроцитов, нарушении функции печени и желчевыводящих путей.

Результаты исследований выдаются с бесплатным комментарием врача.

Колориметрический фотометрический метод.

Мкмоль/л (микромоль на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Билирубин – желтый пигмент, который является компонентом желчи и образуется в селезенке и костном мозге при распаде эритроцитов. В норме эритроциты разрушаются через 110-120 дней после выхода из костного мозга. При этом из погибших клеток высвобождается металлопротеин гемоглобин, состоящий из железосодержащей части – гема и белкового компонента – глобина. От гема отщепляется железо, которое повторно используется в качестве необходимого компонента ферментов и других белковых структур, а гемовые белки превращаются в билирубин. Непрямой (неконъюгированный) билирубин с помощью альбуминов доставляется кровью в печень, где благодаря ферменту глюкуронилтрансферазе соединяется с глюкуроновой кислотой и образует прямой (конъюгированный) билирубин. Процесс превращения водонерастворимого билирубина в водорастворимый называется конъюгацией. Связанная фракция пигмента практически не поступает в кровь и в норме экскретируется с желчью. Билирубин в просвете кишечника под действием бактерий кишечника метаболизируется и выводится с калом, придавая ему темную окраску.

Прямой билирубин назван так в связи с методикой лабораторного исследования. Данный водорастворимый пигмент непосредственно взаимодействует с реактивами (диазореактивом Эрлиха), добавленными в пробу крови. Неконъюгированный (непрямой, свободный) билирубин нерастворим в воде, и для его определения необходимы дополнительные реактивы.

В норме за сутки в человеческом организме вырабатывается 250-350 мг билирубина. Выработка более 30-35 мкмоль/л проявляется желтушностью кожных покровов и склер. По механизму развития желтухи и преобладанию фракций билирубина в крови выделяют надпеченочную (гемолитическую), печеночную (паренхиматозную) или подпеченочную (механическую, обтурационную) желтуху.

При повышенном разрушении эритроцитов (гемолизе) или нарушенном захвате печенью желчного пигмента увеличивается содержание билирубина за счет неконъюгированной фракции без повышения уровня связанного пигмента (надпеченочная желтуха). Данная клиническая ситуация наблюдается при некоторых врождённых состояниях, связанных с нарушением конъюгации билирубина, например при синдроме Жильбера.

При наличии преграды на пути выхода желчи в двенадцатиперстную кишку или нарушениях желчевыделения в крови повышается прямой билирубин, что нередко является признаком обтурационной (механической) желтухи. При обструкции желчевыводящих путей прямой билирубин попадает в кровь, а затем и в мочу. Он является единственной фракцией билирубина, способной выделяться почками и окрашивать мочу в темный цвет.

Увеличение билирубина за счет прямой и непрямой фракции указывает на заболевание печени с нарушением захвата и выделения желчных пигментов.

Повышение непрямого билирубина нередко наблюдается у новорождённых в первые 3 дня жизни. Физиологическая желтуха связана с повышенным распадом эритроцитов с фетальным гемоглобином и недостаточной зрелостью ферментных систем печени. При затянувшейся желтухе у новорождённых необходимо исключать гемолитическую болезнь и врождённую патологию печени и желчевыводящих путей. При конфликте групп крови матери и ребенка возникает повышенный распад эритроцитов малыша, что приводит к повышению непрямого билирубина. Неконъюгированный билирубин обладает токсическим действием на клетки нервной системы и может привести к повреждению головного мозга новорождённого. Гемолитическая болезнь новорождённых требует немедленного лечения.

У 1 из 10 тысяч младенцев выявляется атрезия желчевыводящих путей. Данная угрожающая жизни ребенка патология сопровождается повышением билирубина за счет прямой фракции и требует срочного хирургического вмешательства и в некоторых случаях трансплантации печени. У новорождённых также существует вероятность наличия гепатита с повышением как прямого, так и непрямого билирубина.

Изменения уровня фракций билирубина в крови с учетом клинической картины позволяют оценить возможные причины желтухи и определиться с дальнейшей тактикой обследования и лечения.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики состояний, сопровождающихся желтушностью кожных покровов и склер.
• Для оценки степени гипербилирубинемии.
• Для дифференциальной диагностики желтух новорождённых и выявления риска развития билирубиновой энцефалопатии.
• Для диагностики гемолитической анемии.
• Для исследования функционального состояния печени.
• Для диагностики нарушений оттока желчи.
• Для наблюдения за пациентом, принимающим препараты с гепатотоксическими и/или гемолитическими свойствами.
• Для динамического наблюдения за пациентами с гемолитической анемией или патологией печени и желчевыводящих путей.

Когда назначается анализ?

• При клинических признаках патологии печени и желчевыводящих путей (желтуха, потемнение мочи, обесцвечивание стула, зуд кожных покровов, тяжесть и боли в правом подреберье).
• При обследовании новорождённых с выраженной и затянувшейся желтухой.
• При подозрении на гемолитическую анемию.
• При обследовании пациентов, регулярно употребляющих алкоголь.
• При использовании лекарственных препаратов с вероятным гепатотоксическим и/или гемолитическим побочным действием.
• При инфицировании вирусами гепатитов.
• При наличии хронических заболеваний печени (цирроз, гепатит, холецистит, желчнокаменная болезнь).
• При комплексном профилактическом обследовании пациента.

источник