состав калибровочного раствора гемоглобина

Инструкция по применению набора реагентов для определения гемоглобина гемиглобинцианидным методом

от _________ 2011г. № ______

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

набора реагентов для определения гемоглобина

Назначение
Область применения – клиническая медицина, клиническая биохимия. Определение содержания гемоглобина в крови.
Характеристики набора
Принцип метода

Гемоглобин окисляют железосинеродистым калием в гемиглобин. Образующийся при взаимодействии гемиглобина с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид определяют фотометрическим методом.

Состав набора

Смесь реактивов: 1. Калий железосинеродистый 0.4 г

Натрий углекислый кислый 2,0 г

3. Калибровочный раствор гемоглобина

(концентрация указана на ампуле)

Аналитические и диагностические характеристики

Набор рассчитан на проведение 200-400 анализов содержания гемоглобина в пробах в зависимости от оборудования.

Раствор содержит ядовитое вещество!

Во время работы с набором соблюдайте правила техники безопасности. Избегайте контакта раствора с кислотами. После окончания работы вымойте руки теплой водой с мылом. В случае попадания на кожу и слизистые рекомендуется сразу же смыть большим количеством воды. При попадании внутрь немедленно промыть желудок и обратиться к врачу.

Для проведения анализов содержания гемоглобина можно использовать фотоэлектроколориметры, спектрофотометры, а также любое автоматизированное оборудование.

Проведение анализа, регистрация результатов

Приготовление трансформирующего раствора

Смесь реактивов и ацетонциангидрин количественно перенести в мерную колбу вместимостью 2 л, довести до метки дистиллированной водой и тщательно перемешать.

Содержимое ампулы с калибровочным раствором гемоглобина выливают в кювету с толщиной слоя 1 см и измеряют оптическую плотность (Акалибр) при 540 нм относительно трансформирующего раствора (при +15 — +25 оС).

Определение гемоглобина в крови проводят следующим образом: 0.02 мл крови приливают к 5 мл трансформирующего раствора, смесь перемешивают и через 10 мин. измеряют оптическую плотность раствора (Апробы) относительно трансформирующего раствора

Концентрацию гемоглобина рассчитывают по формуле:

Гемоглобин (г/л) = Скалибр (Апробы / Акалибр)

где Скалибр – концентрация гемоглобина в калибровочном растворе,

Апробы – оптическая плотность пробы,

Акалибр – оптическая плотность калибровочного раствора.

Построение калибровочной кривой

Для точного построения калибровочной кривой лучше использовать набор растворов с различными концентрациями гемоглобина.

Если в наличии калибровочный раствор только одной концентрации, то калибровочную кривую можно построить следующим образом:

1) из калибровочного раствора готовят серию растворов согласно таблице:

источник

Диагем Т с калибратором (опр. гемоглобина) на 1000 опр.

Кат. № ГМ-2

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Набор Диагем Т предназначен для количественного определения общего гемоглобина в крови гемиглобинцианидным методом на спектрофотометрах (СФ), фотоэлектрокалориметрах (ФЭК) и гемоглобинометрах. Принцип метода основан на образовании из гемоглобина крови стойкого соединения — гемиглобинцианида, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина. Реакция проходи в два этапа: 1. окисление всех форм гемоглобина крови в метгемоглобин под действием калия железосинеродистого; 2. переход метгемоглобина в гемиглобинцианид под действием цианид-ионов. Трансформирующий реагент представляет собой смесь измельченных и гомогенизированных солей калия железосинеродистого, цианида натрия и гидрокарбоната натрия

Функциональное назначение

Гемоглобинцианидный метод рекомендован Международным комитетом стандартизации в гематологии. Метод позволяет определять все производные гемоглобина, кроме сульфгемоглобина. Допустимая ошибка определения гемоглобина гемоглобинцианидным методом не превышает 2%.

Технические характеристики

Состав набора:
1. Трансформирующий реагент (рН 9,0±0,5 ) — 5 флаконов. Порошок желтого цвета с вкраплением темных и оранжевых частиц.
2. Калибровочный раствор гемоглобинцианида — 1 ампула объемом 5 мл. Прозрачная жидкость красного цвета. Готов к применению. Стандартизован против Международного стандарта.
Готовый трансформирующий раствор стабилен в течение 3 месяцев при комнатной температуре (+18. 25°C).
Калибровочный раствор пригоден в течение 2х часов после вскрытия.
Набор стабилен в течение всего срока годности, указанного на этикетке набора.
Чувствительность — не более 2,5 г/л.
Коэффициент вариации результатов — не превышает 2%.
Зарегистрировано в Росздравнадзор

Документация и инструкции

Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.

На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.

© 2012-2019 Арт-Медика оборудование, реагенты, изделия медицинского назначения для клинической лабораторной диагностики

источник

Определение гемоглобина

2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГЕМ

Принцип метода: Основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива (р-р Драбкина). Под влиянием железисто — синеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина (гемоглобина), который затем превращается при помощи калия в цианметгемоглобин (гемоглобинцианид).

Реактивы: 1) Трансформирующий р-р

Устройство: Гемоглобинометр МиниГЕМ 540 представляет собой специализированный фотометр, предназначенный для определения общего гемоглобина крови гемиглобинцианидным ме­тодом с фотометрированием на длине волны 540 нм.

Диапазон измеряемой прибором оптической плотности составляет от 0 до 0,9. Б, что соответствует концентрации общего гемоглобина крови от 0 до 360 г/л. В приборе используется стандартная проб подготовка — 20 мкл крови, разведение 1:250. Суммар­ная погрешность определения гемоглобина (с учетом погрешностей дозаторов и по­грешностей биохимического метода), полученная при сравнительных медицинских испытаниях, не превышает 2% (коэффициент вариации) во всем диапазоне измеряе­мых концентраций. При этом собственная погрешность гемоглобинометра как фото­метра — не более 1%, а воспроизводимость, оцененная по коэффициенту вариации, — не более 0,25%.

Два фактора обеспечивают это качество прибора:

высокая воспризводимость характеристик раствора гемиглобинцианида, который сохраняет свои свойства при надлежащем хранении долгие годы, в т. ч. коэффициента пересчета оптической плотности в концентрацию гемоглобина (или фактора калиб­ровки);

конструкция гемоглобинометра МиниГЕМ 540 обеспечивает высокую надежность фотометрических параметров прибора. МиниГЕМ 540 снабжен функцией саморегули­рования, он обладает многолетней стабильностью измерений.

Другая отличительная особенность гемоглобинометра — полностью автоматизирован­ная процедура фотометрирования.

Для определения гемоглобина достаточно опустить кювету с фотометрической про­бой в прибор, и через мгновенье на дисплее отобразится значение концентрации. Пере­счет оптической плотности раствора в концентрацию производится автоматически. Перед измерением прибор не нужно включать, «прогревать», подстраивать или калибровать. Гемоглобинометр автоматически выключится при вынимании кюветы до следующего из­мерения.

Третья особенность гемоглобинометра МиниГЕМ 540 — его портативность и низкое энергопотребление.

Масса прибора без батарей не превышает 300 г. Питание от сети че­рез адаптер или от встроенных батарей. Ресурс батарей — 1 000 000 измерений, или 4 года работы.

Для контроля работоспособности гемоглобинометра используется контрольная стек­лянная мера, паспортизованная для каждого прибора. Внутрилабораторный и внешний контроль качества может проводиться с помощью обычных контрольных материалов -контрольных растворов гемоглобина.

подготовить пробирки, поместив в каждую из них по 5 мл трансформирующего рас­твора (раствор Драбкина);

во время взятия крови в каждую пробирку перенести по 20 мкл капиллярной крови( 0,02 мл пипеткой Сали) и тщательно перемешать раствор;

через 20 мин каждую пробирку перед измерением перемешать путем переворачивания пробирки вверх вниз (время лизирования) и провести серию измерений:

Учет результата:

перелить в оптическую кювету реакционную смесь из очередной пробирки;

опустить оптическую кювету в фотометрическую ячейку прибора, при этом автома­тически произойдет фотометрирование реакционной смеси, сопровождаемое звуко­вым сигналом, и на индикаторе появится число, соответствующее концентрации гемоглобина;

записать результат измерения.

2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре MF-1020

Введение: мини фотометры являются миниатюрными настольными приборами для измерения гемоглобина крови.

Особенности прибора: цифровой индикатор, кювета открытого типа, относительная устойчивость к светорассеиванию, двухканальная оптическая схема.

Прибор показывает концентрацию гемоглобина в г/л. Светопоглощение зеленого света с длиной волны(546 нм) раствором гемиглобинцианида напрямую переводятся в единицы измерения гемоглобина. Настройка и калибровка прибора осуществляется при помощи двух ручек — « ZERO» и «CAL» . К прибору прилагается светофильтр (калибратор), назначение которого — убедиться в исправности оптических и электронных узлов и калибровки минифотометра.

Масса прибора 1 кг 300 гр.

2.В течение 10 мин прогрейте.

3.Убедитесь в том, что прибор правильно откалиброван.

4.Установите кювету с холостой пробой реагента трансформирующего раствора. 5.С помощью ручки « ZERO» на цифровом индикаторе установите нулевое значение. 6.Приготовьте кровь, разбавив ее 1:251 с трансформирующим раствором и проведите измерение.

1 .Двадцать микрометров крови (0,02 мл) необходимо разбавить в 5 ,0 мл трансформирующего раствора р-ра Драбкина- 1:21

2.Хорошо перемешайте (встряхните). Прежде чем приступить к измерению, подождите 5-10 мин, особенно если реагент не содержит детергент.

Калибровка минифотометра по стандартному р-ру гемиглобинцианида

Вставьте кювету, содержащую трансформирующий реактив (р-р Драбкина) в кюветный отсек.

При помощи ручки « ZERO» установите нулевое значение в цифровом табло.

Вставьте кювету, содержащую стандартный р-р гемиглобинцианида, в кюветный отсек.

При помощи ручки « CAL» установите данное значение стандартного калибровочного р-ра в цифровом табло (пример 150 г/л).

Повторите процедуру калибровки от пункта 1 до пункта 4.

Калибровка окончена, и Вы можете приступить к измерению

Калибровка минифотометра при помощи калибратора (по фактору)

1.Вставьте калибратор со светофильтром в кюветный отсек таким образом, чтобы была

видна надпись «ZERO» с цифровым значением (например, 0.1.6)

2.При помощи ручки «ZERO» установите это значение (п.п.0.1.6) в цифровом табло.

3.Переверните калибратор и вставьте его в кюветный отсек таким образом, чтобы

была видна надпись «CAL» с калибровочным значением (пример 159).

4.При помощи ручки «CAL» установите данное значение на цифровом табло.

Повторите процедуру от пункта 1 до пункта 4.

Калибровка окончена, и Вы можете приступать к измерениям.

1.Любая модификация р-ра пригодна для применения.

2.Разбавление 10 мкл крови в 2,5 мл трансформирующего не пригодно для этой модели.

3.Можно приготавливать самим р-р-1 раз в месяц, хранится в посуде из темного стекла.

2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре

Принцип метода: Гемоглобин, взаимодей­ствуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеродистого калия K3[Fe(CN)6] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропор­циональна содержанию гемоглобина в пробе крови.

Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCb растворяют в 1 л дистил­лированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинцианида (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» —64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз).

Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 20 мин при комнатной температуре.

Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина вол­ны 540 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм (1 см) против дистиллированной воды.

Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу.

Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандар­тному раствору гемиглобинцианида или по формуле:

Где С- концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л

Ео — оптическая плотность опытной, ед. опт. Плотность

Ек- оптическая плотность калибровочной пробы, ед.плот.

120-концекнтрация гемоглобина кВ калибровочном растворе, г/л.

Приготовленные разведения фотометрируют. против дистиллированной воды («холостая» проба).

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9768 — | 7466 — или читать все.

источник

Диагем К, набор контрольных растворов гемоглобина, 450 опр.

Кат. № ГМ-3

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Набор контрольных растворов гемоглобина для автоматических и полуавтоматических коагулометров. Являются аналогами крови с аттестованным значением гемоглобина (нормальным, пониженным или повышенным), точные средние значения концентрации гемоглобина в каждом флаконе указаны в паспорте и на флаконе. Изготовлены на основе высокоочищенного гемоглобина, полученного из крови доноров. Принцип метода основан на образовании из гемоглобина крови стойкого соединения — гемиглобинцианида, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина. Рассчитан на 450 определений при расходе 20 мкл контрольного раствора гемоглобина на один анализ

Функциональное назначение

Внутренний контроль правильности и воспроизводимости определений общего гемоглобина гемиглобинцианидным методом на спектрофотометрах (СФ), фотоэлектрокалориметрах (ФЭК), гемоглобинометрах. Не использовать для калибровки приборов!

Технические характеристики

Состав набора:
3 флакона очищенного раствора гемоглобина с концентрацией 80, 120 и 160 г/л.
Регент готов к применению.
Чувствительность 2,5 г/л.
Линейность определения от 0 до 200 г/л.
Допустимое отклонение от аттестованного значения концентрации гемоглобинцианида в калибровочном растворе не более 2%.
Коэффициент вариации результатов — не более 2%.
После вскрытия ампулы раствор должен быть использован в течение 2 часов.
Срок годности набора — 24 месяца.
Компоненты сохраняют стабильность при температуре хранения 2. 8°C в укупоренном виде.

Документация и инструкции

Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.

На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.

© 2012-2019 Арт-Медика оборудование, реагенты, изделия медицинского назначения для клинической лабораторной диагностики

источник

Состав калибровочного раствора гемоглобина

Исследование крови

Определение концентрации гемоглобина

Исследование содержания гемоглобина в крови (гемоглобинометрия) включает определение гемоглобина и его дериватов, которые присутствуют в крови здоровых людей или появляются при различных патологических состояниях. У здоровых людей гемоглобин находится в крови, главным образом, в виде оксигемоглобина, восстановленного гемоглобина и в небольшом количестве — метгемоглобина, карбоксигемоглобина и вердоглобина.

Для определения концентрации гемоглобина наиболее часто применяются колориметрические методики, основанные на том, что присоединение к гему различных химических групп сопровождается изменением окраски.

Унифицированная гемиглобинцианидная методика

Принцип . Гемоглобин окисляется в метгемоглобин (гемиглобин) железосинеродистым калием, который, вступая в реакцию с ацетонциангидрином, образует окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид). Интенсивность окраски раствора цианметгемоглобина пропорциональна содержанию гемоглобина.

  • 1) трансформирующий раствор: натрия гидрокарбонат (NaHCO3) — 1,0 г; ацетонциангидрин — 0,5 мг; калий железосинеродистый (красная кровяная соль, K3[Fe(CN)6)] — 0,2 г; дистиллированная вода — до 1 л. Раствор желтого цвета, прозрачный; при обесцвечивании или появлении осадка непригоден. Реактив считается годным для употребления в течение нескольких месяцев после приготовления при хранении в посуде из темного стекла;
  • 2) стандартный калибровочный раствор гемиглобинцианида промышленного изготовления (лучше от фирмы-лидера на рынке диагностического оборудования). Например, стандартный раствор фирмы «Иммуна» имеет концентрацию гемиглобинцианида 61,23 мг/100 мл, что соответствует концентрации гемоглобина в крови 15,4 г/100мл при разведении в 251 раз. Хранят в холодильнике в незамороженном виде, защищая от света.

Ход определения. В пробирку, содержащую 5 мл трансформирующего раствора, добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Хорошо перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Фотометрируют при длине волны 500—560 им (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы (трансформирующий раствор). Измеряют в тех же условиях стандартный раствор. Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по разведениям стандартного раствора гемиглобинцианида в трансформирующем растворе (см. табл. «Приготовление разведений стандартного раствора гемиглобинцианида для построения калибровочного графика»).

Приготовление разведений стандартного раствора гемиглобинцианида для построения калибровочного графика

№ пробиркиСтандартный раствор, млТрансформирующий раствор, млКонцентрация гемоглобина, г/л
16Контрольная проба
22450
342100
46150

По оси абсцисс откладывают известные цифры концентрации гемоглобина, а по оси ординат — показатели оптической плотности со шкалы прибора либо рассчитанные по формуле:

где Eоп — экстинкция опытной пробы; Eст — экстинкция стандартного раствора; С — концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, мг/100мл; К — коэффициент разведения крови; 0,01 — коэффициент для пересчета в г/л.

Определение гемоглобина гематологическими анализаторами также основано на методе колориметрии. Ход исследования осуществляется согласно инструкции к набору реактивов.

Нормальные величины

У здоровых людей концентрация гемоглобина в крови составляет:

  • мужчины — 132–164 г/л;
  • женщины — 120–145 г/л;
  • новорожденные (кровь из пуповины) — 135–195 г/л;
  • дети 1 года — 110–130 г/л;
  • дети 10–12 лет — 115–145 г/л.

Дневные колебания . Показатели содержания гемоглобина минимальны утром и максимальны вечером. Значимым изменением уровня гемоглобина считается 15 г/л или более.

Клиническое значение . Содержание гемоглобина в крови ниже нормы для данного пола и возраста называют анемией. Согласно критериям ВОЗ, анемия как клинический синдром определяется при снижении концентрации гемоглобина в периферической крови ниже 110 г/л для любого возраста и пола.

Следует иметь в виду, что диагностика анемии не может проводиться лишь на основании определения концентрации гемоглобина в крови. Это исследование только устанавливает факт наличия анемии. Для уточнения ее характера необходимо определение количества эритроцитов, цветового показателя, изучение морфологии эритроцитов и других показателей.

источник