состав калибровочного раствора гемоглобина

Содержание

Инструкция по применению набора реагентов для определения гемоглобина гемиглобинцианидным методом

от _________ 2011г. № ______

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

набора реагентов для определения гемоглобина

Назначение

Область применения – клиническая медицина, клиническая биохимия. Определение содержания гемоглобина в крови.

Характеристики набора

Принцип метода

Гемоглобин окисляют железосинеродистым калием в гемиглобин. Образующийся при взаимодействии гемиглобина с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид определяют фотометрическим методом.

Состав набора

Смесь реактивов: 1. Калий железосинеродистый 0.4 г

Натрий углекислый кислый 2,0 г

3. Калибровочный раствор гемоглобина

(концентрация указана на ампуле)

Аналитические и диагностические характеристики

Набор рассчитан на проведение 200-400 анализов содержания гемоглобина в пробах в зависимости от оборудования.

Раствор содержит ядовитое вещество!

Во время работы с набором соблюдайте правила техники безопасности. Избегайте контакта раствора с кислотами. После окончания работы вымойте руки теплой водой с мылом. В случае попадания на кожу и слизистые рекомендуется сразу же смыть большим количеством воды. При попадании внутрь немедленно промыть желудок и обратиться к врачу.

Для проведения анализов содержания гемоглобина можно использовать фотоэлектроколориметры, спектрофотометры, а также любое автоматизированное оборудование.

Проведение анализа, регистрация результатов

Приготовление трансформирующего раствора

Смесь реактивов и ацетонциангидрин количественно перенести в мерную колбу вместимостью 2 л, довести до метки дистиллированной водой и тщательно перемешать.

Содержимое ампулы с калибровочным раствором гемоглобина выливают в кювету с толщиной слоя 1 см и измеряют оптическую плотность (Акалибр) при 540 нм относительно трансформирующего раствора (при +15 — +25 оС).

Определение гемоглобина в крови проводят следующим образом: 0.02 мл крови приливают к 5 мл трансформирующего раствора, смесь перемешивают и через 10 мин. измеряют оптическую плотность раствора (Апробы) относительно трансформирующего раствора

Концентрацию гемоглобина рассчитывают по формуле:

Гемоглобин (г/л) = Скалибр (Апробы / Акалибр)

где Скалибр – концентрация гемоглобина в калибровочном растворе,

Апробы – оптическая плотность пробы,

Акалибр – оптическая плотность калибровочного раствора.

Построение калибровочной кривой

Для точного построения калибровочной кривой лучше использовать набор растворов с различными концентрациями гемоглобина.

Если в наличии калибровочный раствор только одной концентрации, то калибровочную кривую можно построить следующим образом:

1) из калибровочного раствора готовят серию растворов согласно таблице:

источник

Диагем Т с калибратором (опр. гемоглобина) на 1000 опр.

Кат. № ГМ-2

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Набор Диагем Т предназначен для количественного определения общего гемоглобина в крови гемиглобинцианидным методом на спектрофотометрах (СФ), фотоэлектрокалориметрах (ФЭК) и гемоглобинометрах. Принцип метода основан на образовании из гемоглобина крови стойкого соединения — гемиглобинцианида, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина. Реакция проходи в два этапа: 1. окисление всех форм гемоглобина крови в метгемоглобин под действием калия железосинеродистого; 2. переход метгемоглобина в гемиглобинцианид под действием цианид-ионов. Трансформирующий реагент представляет собой смесь измельченных и гомогенизированных солей калия железосинеродистого, цианида натрия и гидрокарбоната натрия

Функциональное назначение

Гемоглобинцианидный метод рекомендован Международным комитетом стандартизации в гематологии. Метод позволяет определять все производные гемоглобина, кроме сульфгемоглобина. Допустимая ошибка определения гемоглобина гемоглобинцианидным методом не превышает 2%.

Технические характеристики

Состав набора:
1. Трансформирующий реагент (рН 9,0±0,5 ) — 5 флаконов. Порошок желтого цвета с вкраплением темных и оранжевых частиц.
2. Калибровочный раствор гемоглобинцианида — 1 ампула объемом 5 мл. Прозрачная жидкость красного цвета. Готов к применению. Стандартизован против Международного стандарта.
Готовый трансформирующий раствор стабилен в течение 3 месяцев при комнатной температуре (+18. 25°C).
Калибровочный раствор пригоден в течение 2х часов после вскрытия.
Набор стабилен в течение всего срока годности, указанного на этикетке набора.
Чувствительность — не более 2,5 г/л.
Коэффициент вариации результатов — не превышает 2%.
Зарегистрировано в Росздравнадзор

Документация и инструкции

Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.

На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.

источник

Определение гемоглобина

2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГЕМ

Принцип метода: Основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива (р-р Драбкина). Под влиянием железисто — синеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина (гемоглобина), который затем превращается при помощи калия в цианметгемоглобин (гемоглобинцианид).

Реактивы: 1) Трансформирующий р-р

Устройство: Гемоглобинометр МиниГЕМ 540 представляет собой специализированный фотометр, предназначенный для определения общего гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом с фотометрированием на длине волны 540 нм.

Диапазон измеряемой прибором оптической плотности составляет от 0 до 0,9. Б, что соответствует концентрации общего гемоглобина крови от 0 до 360 г/л. В приборе используется стандартная проб подготовка — 20 мкл крови, разведение 1:250. Суммарная погрешность определения гемоглобина (с учетом погрешностей дозаторов и погрешностей биохимического метода), полученная при сравнительных медицинских испытаниях, не превышает 2% (коэффициент вариации) во всем диапазоне измеряемых концентраций. При этом собственная погрешность гемоглобинометра как фотометра — не более 1%, а воспроизводимость, оцененная по коэффициенту вариации, — не более 0,25%.

Два фактора обеспечивают это качество прибора:

высокая воспризводимость характеристик раствора гемиглобинцианида, который сохраняет свои свойства при надлежащем хранении долгие годы, в т. ч. коэффициента пересчета оптической плотности в концентрацию гемоглобина (или фактора калибровки);

конструкция гемоглобинометра МиниГЕМ 540 обеспечивает высокую надежность фотометрических параметров прибора. МиниГЕМ 540 снабжен функцией саморегулирования, он обладает многолетней стабильностью измерений.

Другая отличительная особенность гемоглобинометра — полностью автоматизированная процедура фотометрирования.

Для определения гемоглобина достаточно опустить кювету с фотометрической пробой в прибор, и через мгновенье на дисплее отобразится значение концентрации. Пересчет оптической плотности раствора в концентрацию производится автоматически. Перед измерением прибор не нужно включать, «прогревать», подстраивать или калибровать. Гемоглобинометр автоматически выключится при вынимании кюветы до следующего измерения.

Третья особенность гемоглобинометра МиниГЕМ 540 — его портативность и низкое энергопотребление.

Масса прибора без батарей не превышает 300 г. Питание от сети через адаптер или от встроенных батарей. Ресурс батарей — 1 000 000 измерений, или 4 года работы.

Для контроля работоспособности гемоглобинометра используется контрольная стеклянная мера, паспортизованная для каждого прибора. Внутрилабораторный и внешний контроль качества может проводиться с помощью обычных контрольных материалов -контрольных растворов гемоглобина.

подготовить пробирки, поместив в каждую из них по 5 мл трансформирующего раствора (раствор Драбкина);

во время взятия крови в каждую пробирку перенести по 20 мкл капиллярной крови( 0,02 мл пипеткой Сали) и тщательно перемешать раствор;

через 20 мин каждую пробирку перед измерением перемешать путем переворачивания пробирки вверх вниз (время лизирования) и провести серию измерений:

Учет результата:

перелить в оптическую кювету реакционную смесь из очередной пробирки;

опустить оптическую кювету в фотометрическую ячейку прибора, при этом автоматически произойдет фотометрирование реакционной смеси, сопровождаемое звуковым сигналом, и на индикаторе появится число, соответствующее концентрации гемоглобина;

записать результат измерения.

2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре MF-1020

Введение: мини фотометры являются миниатюрными настольными приборами для измерения гемоглобина крови.

Особенности прибора: цифровой индикатор, кювета открытого типа, относительная устойчивость к светорассеиванию, двухканальная оптическая схема.

Прибор показывает концентрацию гемоглобина в г/л. Светопоглощение зеленого света с длиной волны(546 нм) раствором гемиглобинцианида напрямую переводятся в единицы измерения гемоглобина. Настройка и калибровка прибора осуществляется при помощи двух ручек — « ZERO» и «CAL» . К прибору прилагается светофильтр (калибратор), назначение которого — убедиться в исправности оптических и электронных узлов и калибровки минифотометра.

Масса прибора 1 кг 300 гр.

2.В течение 10 мин прогрейте.

3.Убедитесь в том, что прибор правильно откалиброван.

4.Установите кювету с холостой пробой реагента трансформирующего раствора. 5.С помощью ручки « ZERO» на цифровом индикаторе установите нулевое значение. 6.Приготовьте кровь, разбавив ее 1:251 с трансформирующим раствором и проведите измерение.

1 .Двадцать микрометров крови (0,02 мл) необходимо разбавить в 5 ,0 мл трансформирующего раствора р-ра Драбкина- 1:21

2.Хорошо перемешайте (встряхните). Прежде чем приступить к измерению, подождите 5-10 мин, особенно если реагент не содержит детергент.

Калибровка минифотометра по стандартному р-ру гемиглобинцианида

Вставьте кювету, содержащую трансформирующий реактив (р-р Драбкина) в кюветный отсек.

При помощи ручки « ZERO» установите нулевое значение в цифровом табло.

Вставьте кювету, содержащую стандартный р-р гемиглобинцианида, в кюветный отсек.

При помощи ручки « CAL» установите данное значение стандартного калибровочного р-ра в цифровом табло (пример 150 г/л).

Повторите процедуру калибровки от пункта 1 до пункта 4.

Калибровка окончена, и Вы можете приступить к измерению

Калибровка минифотометра при помощи калибратора (по фактору)

1.Вставьте калибратор со светофильтром в кюветный отсек таким образом, чтобы была

видна надпись «ZERO» с цифровым значением (например, 0.1.6)

2.При помощи ручки «ZERO» установите это значение (п.п.0.1.6) в цифровом табло.

3.Переверните калибратор и вставьте его в кюветный отсек таким образом, чтобы

была видна надпись «CAL» с калибровочным значением (пример 159).

4.При помощи ручки «CAL» установите данное значение на цифровом табло.

Повторите процедуру от пункта 1 до пункта 4.

Калибровка окончена, и Вы можете приступать к измерениям.

1.Любая модификация р-ра пригодна для применения.

2.Разбавление 10 мкл крови в 2,5 мл трансформирующего не пригодно для этой модели.

3.Можно приготавливать самим р-р-1 раз в месяц, хранится в посуде из темного стекла.

2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре

Принцип метода: Гемоглобин, взаимодействуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеродистого калия K₃[Fe(CN)₆] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина в пробе крови.

Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCb растворяют в 1 л дистиллированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинцианида (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» —64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз).

Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 20 мин при комнатной температуре.

Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина волны 540 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм (1 см) против дистиллированной воды.

Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу.

Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандартному раствору гемиглобинцианида или по формуле:

Где С- концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л

Ео — оптическая плотность опытной, ед. опт. Плотность

Ек- оптическая плотность калибровочной пробы, ед.плот.

120-концекнтрация гемоглобина кВ калибровочном растворе, г/л.

Приготовленные разведения фотометрируют. против дистиллированной воды («холостая» проба).

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9768 — | 7466 — или читать все.

источник

Диагем К, набор контрольных растворов гемоглобина, 450 опр.

Кат. № ГМ-3

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Набор контрольных растворов гемоглобина для автоматических и полуавтоматических коагулометров. Являются аналогами крови с аттестованным значением гемоглобина (нормальным, пониженным или повышенным), точные средние значения концентрации гемоглобина в каждом флаконе указаны в паспорте и на флаконе. Изготовлены на основе высокоочищенного гемоглобина, полученного из крови доноров. Принцип метода основан на образовании из гемоглобина крови стойкого соединения — гемиглобинцианида, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина. Рассчитан на 450 определений при расходе 20 мкл контрольного раствора гемоглобина на один анализ

Функциональное назначение

Внутренний контроль правильности и воспроизводимости определений общего гемоглобина гемиглобинцианидным методом на спектрофотометрах (СФ), фотоэлектрокалориметрах (ФЭК), гемоглобинометрах. Не использовать для калибровки приборов!

Технические характеристики

Состав набора:
3 флакона очищенного раствора гемоглобина с концентрацией 80, 120 и 160 г/л.
Регент готов к применению.
Чувствительность 2,5 г/л.
Линейность определения от 0 до 200 г/л.
Допустимое отклонение от аттестованного значения концентрации гемоглобинцианида в калибровочном растворе не более 2%.
Коэффициент вариации результатов — не более 2%.
После вскрытия ампулы раствор должен быть использован в течение 2 часов.
Срок годности набора — 24 месяца.
Компоненты сохраняют стабильность при температуре хранения 2. 8°C в укупоренном виде.

Документация и инструкции

источник

Состав калибровочного раствора гемоглобина

Исследование крови

Определение концентрации гемоглобина

Исследование содержания гемоглобина в крови (гемоглобинометрия) включает определение гемоглобина и его дериватов, которые присутствуют в крови здоровых людей или появляются при различных патологических состояниях. У здоровых людей гемоглобин находится в крови, главным образом, в виде оксигемоглобина, восстановленного гемоглобина и в небольшом количестве — метгемоглобина, карбоксигемоглобина и вердоглобина.

Для определения концентрации гемоглобина наиболее часто применяются колориметрические методики, основанные на том, что присоединение к гему различных химических групп сопровождается изменением окраски.

Унифицированная гемиглобинцианидная методика

Принцип . Гемоглобин окисляется в метгемоглобин (гемиглобин) железосинеродистым калием, который, вступая в реакцию с ацетонциангидрином, образует окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид). Интенсивность окраски раствора цианметгемоглобина пропорциональна содержанию гемоглобина.

1) трансформирующий раствор: натрия гидрокарбонат (NaHCO₃) — 1,0 г; ацетонциангидрин — 0,5 мг; калий железосинеродистый (красная кровяная соль, K3[Fe(CN)₆)] — 0,2 г; дистиллированная вода — до 1 л. Раствор желтого цвета, прозрачный; при обесцвечивании или появлении осадка непригоден. Реактив считается годным для употребления в течение нескольких месяцев после приготовления при хранении в посуде из темного стекла;
2) стандартный калибровочный раствор гемиглобинцианида промышленного изготовления (лучше от фирмы-лидера на рынке диагностического оборудования). Например, стандартный раствор фирмы «Иммуна» имеет концентрацию гемиглобинцианида 61,23 мг/100 мл, что соответствует концентрации гемоглобина в крови 15,4 г/100мл при разведении в 251 раз. Хранят в холодильнике в незамороженном виде, защищая от света.

Ход определения. В пробирку, содержащую 5 мл трансформирующего раствора, добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Хорошо перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Фотометрируют при длине волны 500—560 им (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы (трансформирующий раствор). Измеряют в тех же условиях стандартный раствор. Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по разведениям стандартного раствора гемиглобинцианида в трансформирующем растворе (см. табл. «Приготовление разведений стандартного раствора гемиглобинцианида для построения калибровочного графика»).

Приготовление разведений стандартного раствора гемиглобинцианида для построения калибровочного графика

№ пробирки	Стандартный раствор, мл	Трансформирующий раствор, мл	Концентрация гемоглобина, г/л
1	—	6	Контрольная проба
2	2	4	50
3	4	2	100
4	6	—	150

По оси абсцисс откладывают известные цифры концентрации гемоглобина, а по оси ординат — показатели оптической плотности со шкалы прибора либо рассчитанные по формуле:

где E_оп — экстинкция опытной пробы; E_ст — экстинкция стандартного раствора; С — концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, мг/100мл; К — коэффициент разведения крови; 0,01 — коэффициент для пересчета в г/л.

Определение гемоглобина гематологическими анализаторами также основано на методе колориметрии. Ход исследования осуществляется согласно инструкции к набору реактивов.

Нормальные величины

У здоровых людей концентрация гемоглобина в крови составляет:

мужчины — 132–164 г/л;
женщины — 120–145 г/л;
новорожденные (кровь из пуповины) — 135–195 г/л;
дети 1 года — 110–130 г/л;
дети 10–12 лет — 115–145 г/л.

Дневные колебания . Показатели содержания гемоглобина минимальны утром и максимальны вечером. Значимым изменением уровня гемоглобина считается 15 г/л или более.

Клиническое значение . Содержание гемоглобина в крови ниже нормы для данного пола и возраста называют анемией. Согласно критериям ВОЗ, анемия как клинический синдром определяется при снижении концентрации гемоглобина в периферической крови ниже 110 г/л для любого возраста и пола.

Следует иметь в виду, что диагностика анемии не может проводиться лишь на основании определения концентрации гемоглобина в крови. Это исследование только устанавливает факт наличия анемии. Для уточнения ее характера необходимо определение количества эритроцитов, цветового показателя, изучение морфологии эритроцитов и других показателей.

источник