Tunnel тест спермограмма где сделать

Фрагментация ДНК сперматозоидов — сдать анализ

Срок готовности: 1-3 рабочих дня

Биоматериал: сперма (эякулят)

Фрагментация ДНК сперматозоидов: что это и как ее измерять

В лаборатории СПЕРМА-ТЕСТ определение индекса фрагментации ДНК проводится методом HALO.

Что такое тест для оценки фрагментации ДНК?

HALO-тест это актуальный метод оценки целостности ДНК. Поэтому сначала мы рассмотрим его.
В отличие от других методов, HALO выявляет и “подсвечивает” не поврежденную, а целую ДНК. Вокруг “здоровых” сперматозоидов с неповрежденной ДНК формируется ореол, который отчетливо виден на оптическом микроскопе. Таких ореолов нет у мужчин с поврежденной ДНК.

Анализ выполняют спустя 30-60 минут после разжижения эякулята. Оценивают от 200 до 500 сперматозоидов с хвостами (незрелые не оценивают).

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов: фото с микроскопа

У сперматозоидов с неповрежденной ДНК-молекулой есть четкий большой ореол. У сперматозоидов с фрагментацией (разрывами) ДНК такого ореола нет или он не четкий.

В основе теста HALO лежит метод SCD (запатентован компанией Halotech) . На сегодняшний момент этот метод активно используется в клинической практике и участвует во множестве клинических испытаний. HALO считается более чувствительным тестом, по сравнению с остальными.

Референсное значение (норма) для этого теста – 20% и ниже.

Это значит, что сперматозоидов с фрагментацией ДНК должно быть меньше 20% от общего количества.

Как проводится анализ фрагментации ДНК (HALO-тест)?

Лаборант смешивает сперму со специальным реактивом, запуская тем самым процесс денатурации ДНК, а затем окрашивания. Если ДНК спермы не повреждена (не фрагментирована), вокруг плотного центрального ядра ДНК образуется четкий «ореол». Если ДНК спермы имеет разрывы, то ореола нет, даже если он проявляется, то очень тонкий и неясный. Это хорошо видно под микроскопом, когда сперматолог-эмбриолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК. Результат подсчета выражается в процентах, и в норме он не должен быть более 20%.

Для полноты обследования параллельно с анализом фрагментации ДНК обычно выполняют спермограмму и ЭМИС (электронно-микроскопическое исследование спермы). Если они были сделаны ранее, но не более 3 месяцев назад, покажите их врачу на консультации. Все 3 анализа можно провести из одной порции спермы.

Как сдавать сперму и готовиться к анализу?

Подготовка подразумевает воздержание в течение 2–5 дней.

Метод сбора эякулята — мастурбация.

Ёмкость для сбора эякулята — стерильный контейнер (бесплатно у администратора лаборатории)

Непосредственно перед сбором материала нужно освободить от содержимого мочевой пузырь и помыть половые органы

Если тест проводится неоднократно, продолжительность воздержания должна быть всегда одинаковой. Это важно для сравнения результатов в динамике.

Если образец собирается дома, то доставить контейнер в лабораторию должен курьер в контейнере, поддерживающим температуру.

Результат теста на фрагментацию и его расшифровка

У каждого теста свои нормы (референсные значения). После проведения исследования формируется протокол, где указан индекс фрагментации ДНК.

Ниже описаны варианты результатов и рекомендации по тактике лечения. Эти рекомендации основаны на исследованиях, проводимых реальными научными группами за последние 10 лет. Это ценный исследовательский опыт, но это все равно только рекомендации. Интерпретировать результаты должен ваш лечащий врач и исходя из истории болезни предлагать варианты лечения.

Что показывает индекс фрагментации? Он отражает процентное соотношение между «здоровыми» сперматозоидами и сперматозоидами с разрывами в ДНК-цепочках.

Рассмотрим расшифровку на примере норм для HALO-теста.

Если результат выше 50% рекомендуется воспользоваться ИКСИ-технологией. При таких результатах ИКСИ будет эффективнее ЭКО.

Если результат выше 60% шансы на беременность даже с применением вспомогательных репродуктивных технологий крайне низкие. Лучше использовать сперму донора.

Важно

Если индекс фрагментации ДНК сперматозоидов равен 50% и более, даже при использовании репродуктивных технологий наступление беременности маловероятно.

Получили результат на руки? Покажите андрологу.

Популярные вопросы об индексе Фрагментации

Получил результат. Индекс фрагментации 21%. Что это значит?

Это случай пограничного результата. Нет повода для паники. Этот результат самый близкий к норме. Покажите заключение андрологу. Врач может назначить лечение антиоксидантами и рекомендовать оптимизировать образ жизни (режим работы и отдыха, снижение уровня стресса, прогулки на свежем воздухе и спортивная активность).

Фрагментация ДНК сперматозоида и мужское бесплодие

Одна из причин мужского бесплодия – это повреждение (фрагментация) цепочки ДНК, находящейся в ядре головки сперматозоида. Именно в молекуле этой нуклеиновой кислоты закодирована и хранится вся генетическая информация, которая при зачатии передается ребенку. И чем больше в молекуле ДНК таких разрывов, тем меньше вероятность оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом.

Фрагментация ДНК: что покажет спермограмма?

Спермограмма — золотой стандарт первичной оценки качества спермы. Нормы спермограммы не пересматривались с 2010 года. С введением оценки морфологии по Крюгеру, этот анализ достиг максимальной диагностической значимости. Однако до сих пор спермограмма не может объяснить даже половины случаев мужского бесплодия. Поэтому репродуктологам пришлось искать другие, более глубокие и конкретные методы исследования.

Диагностировать разрывы ДНК при проведении спермограммы невозможно. Сперматозоиды с поврежденной ДНК обычно сохраняют хорошую подвижность. Иногда они даже способны к оплодотворению, но наступившая беременность замирает или прерывается уже на ранних сроках.

За последние 10 лет наука убедилась, что повреждения ДНК сперматозоидов напрямую связаны с нарушениями оплодотворения, задержками развития эмбриона, плохой имплантацией, выкидышами. Т.е. со всеми сложностями наступления и начала протекания беременности.

У меня хорошая спермограмма. Не выявлено никакой патоспермии. Зачем мне сдавать анализ на фрагментацию сперматозоида?
Исследования 2016 года показали, что 10% мужчин с нормальными показателями спермограммы имели высокий индекс фрагментации ДНК сперматозоидов и входили в категорию пациентов с идиопатическим бесплодием (т.е. бесплодие по неизвестным причинам). Поэтому есть вероятность, что у вас аналогичный случай. И тогда ваши сперматозоиды с нормальной подвижностью и морфологией будут усиливать шансы на успешную беременность.

Кому назначают Исследование фрагментации ДНК?

Показания для назначения тестов на ДНК-фрагментацию:

• идиопатическое (необъяснимое) мужское бесплодие
• замершая беременность (задержка развития эмбриона)
• многократное и безуспешное ЭКО\ИКСИ
• повторяющиеся выкидыши
• варикоцеле
• возраст мужчины 45 лет и более

Кроме того, тест на фрагментацию ДНК проводится перед замораживанием донорской спермы для оценки ее качества и во время подготовки к проведению ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) или ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов).

Анализ фрагментации ДНК и ВРТ (ЭКО, ИКСИ)

Анализ фрагментаций ДНК помогает определить какой именно из методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) поможет конкретной паре. Так, парам, с низким и средним количеством повреждений ДНК у мужчины помогут внутриматочная инсеминация (IUI) и экстрокорпоральное оплодотворение. А парам с высоким уровнем повреждения ДНК поможет ИКСИ (ICSI).

Единственная группа пар, для которых анализ повреждений ДНК не принесет пользы это те,в которых у мужчины диагностирована и подтверждена олигоастенотератозооспермия (т.е. 3 патоспермии сразу). Таким парам может помочь только ИКСИ и опытный андролог может сразу это сказать.

Анализ на фрагментацию ДНК необходим парам с идиопатическим мужским бесплодием. Т.е. когда диагностика устанавливает, что причина в мужчине, однако не может объяснить причину, поставить диагноз и назначить лечение. Для пары с идиопатическим мужским бесплодием, фрагментация ДНК поможет сохранить время, не тратя его на неудачные попытки ЭКО, безрезультатные схемы лечения и общего укрепления организм. Не тратьте время на пустое волнение, отчаяние и пустое ожидание.

Почему происходит фрагментация ДНК сперматозоидов?

Одним из наиболее изученных механизмов повреждений цепочек ДНК является действие свободных радикалов (активных форм кислорода). Они окисляют молекулу ДНК, нанося ей тем самым ущерб.

Чтобы внести ясность: свободные радикалы и повреждения ДНК есть у всех мужчин. Но в норме таких повреждений не много, а свободным радикалам должны противостоять антиоксиданты.
Антиоксиданты защищают сперматозоиды, поглощая свободные радикалы. Ими богата семенная плазма — жидкость, в которой “плавают” сперматозоиды.

Чтобы выяснить как много таких потенциально опасных свободных радикалов в сперме мужчины, выполняют Исследование активных форм кислорода в нативном эякуляте (ROS) (т.е. так как он есть) или Исследование активных форм кислорода в отмытых сперматозоидах (ROS), отмывая сперматозоиды от семенной плазмы. Какой именно тест следует провести — может подсказать врач.

Чтобы выяснить насколько хорошо антиоксиданты противостоят свободным радикалам, выполняют анализ на антиокислительную активность семенной плазмы.

Что влияет на повышение фрагментаций ДНК?

1. Внешние факторы:

• радиация и токсические химические вещества;
• перенесенные инфекции, в том числе передающиеся половым путем;
• неблагоприятные климатические и экологические условия в районе проживания;
• стресс и нездоровое питание;
• курение, злоупотребление алкоголем;
• варикоцеле;
• возраст мужчины старше 40–45 лет;
• хронические заболевания органов мочеполового тракта;
• химиотерапия;
• генетическая предрасположенность.

2. Внутренние факторы:

• неполное созревание мужских половых клеток;
• в норме мужской организм сам отбраковывает большую часть некачественных сперматозоидов, и в эякулят попадают лишь единицы из них. Если по какой-то причине в работе системы по отбраковке происходит сбой, в сперме оказывается гораздо больше «больных» половых клеток. От этого качество эякуляции не страдает, но снижается вероятность успешного оплодотворения.

Существуют данные исследований, подтверждающие, что женская яйцеклетка, оплодотворенная сперматозоидом с фрагментированной ДНК, способна «вылечить» его, восстановить поврежденную генетическую структуру. Но успех такого «лечения» определяется, в первую очередь, биологическим возрастом и состоянием здоровья женщины. Только молодые яйцеклетки, имеющие высокий потенциал к восстановлению ДНК сперматозоида, способны устранить подобный дефект. Кроме того, большое значение имеют степень разрушения и характер повреждений генетических структур.

Анализы фрагментации ДНК сперматозоидов: HALO или TUNEL?

Главное различие между этими анализами заключается в том, что HALO подсвечивает сперматозоиды с «целой» ДНК, а TUNEL — с поврежденной. Есть так же отличие в чувствительности тестов в пользу HALO и времени выполнения. На анализ фрагментации ДНК методом HALO требуется в 5-7 раз меньше времени.
Индекс фрагментации в отличие от спермограммы показывает нарушения целостности цепочек ДНК. Поврежденная ДНК часто может быть у мужчин с хорошими результатами спермограммы. Потому что сама молекула ДНК никак не влияет на основные параметры, тестируемые при анализе спермограмма: морфология, подвижность, количество сперматозоидов.

Почему анализы разные?

Как только была обнаружена значимая взаимосвязь фрагментации ДНК с проблемами на ранних сроках беременности, начались поиски универсального анализа. Новые методы анализа и исследований фрагментации ДНК появляются каждый год. Все они должны пройти клинические исследования, доказать свою диагностическую значимость. В лаборатории СПЕРМА-ТЕСТ определение Индекса Фрагментации ДНК проводится методом HALO (HALOSPERM) . Мы, как эксперты в области сперматологии рекомендуем использовать именно технологию HALO.

Что такое TUNEL-тест?

Tunel-тест – это микроскопическое исследование спермы, цель которого – обнаружить сперматозоиды с поврежденной ДНК и посчитать их количество.

Метод позволяет оценить масштаб повреждений ДНК в сперматозоидах. Сперма смешивается со специальным реактивом. Запускается ферментативная реакция. Разрывы цепочек ДНК сперматозоидов заполняются флуоресцирующим меченым нуклеотидом. Это видно под микроскопом, когда сперматолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК.

Еще 2-3 года назад TUNEL-тест использовался повсеместно. Однако это был долгий и трудоемкий в выполнении тест. Сейчас более чувствительным и информативным считается тест HALO, что подтверждается клиническими исследованиями. А срок выполнения по сравнению с TUNEL сократился в 5-7 раз.

HALO-тест — это полная альтернатива тесту TUNEL. Новый тест быстрее и эффективнее. Поэтому мы рекомендуем использовать именно его. Однако не все андрологи и репродуктологи обадают информацией о HALO и требуют от пациентов результатов TUNEL-теста. Поэтому мы оставили TUNEL в списке услуг лаборатории.

Сдать анализ на фрагментацию ДНК (HALO): адрес, цена, сроки лаборатории.

HALO – это исследование, которое лучше выполнять в специализированной лаборатории, где работают сперматологи и эмбриологи, а не обычные лаборанты , соблюдаются международные стандарты проведения исследований и принципы доказательной медицины. Андрологи и репродуктологи не доверяют результатам сетевых лабораторий.

Сдать сперму для проведения HALO можно в лаборатории сперматологии Sperma-test.ru.
Стоимость HALO-теста (альтернатива TUNEL) – 7000 р.
Адрес лаборатории где можно сдать анализ:

Адрес: г.Москва ул.Беговая д.7
м.Беговая
Лаборатория сперматологии СПЕРМА-ТЕСТ

Записаться на прием и задать вопрос можно по телефону: +7 495 199-7554

источник

97-83-300. Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов методом TUNEL (Заказывается только со спермограммой)

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): B03.053.002.001 «Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL»

Срок выполнения (в лаборатории): 10 р.д. *

Описание

Заказ только с услугой «Спермограмма» или прикладываются результаты спермограммы за последние 7 дней.

Исследование, направленное на выявление целостности генетического материала сперматозоидов, для оценки мужской фертильности.

Данный тест проводится одновременно со спермограммой, но особенностью является то, что спермограмма оценивает количество, подвижность и морфологию сперматозоидов, однако не может идентифицировать разрывы в ДНК, а именно целостность ДНК обеспечивает нормальное наступление беременности.

Показания к назначению

• «Идиопатическое» бесплодие (результаты исследования эякулята не выходят за рамки нормы, не выявлены другие причины).
• Наличие спонтанных абортов в анамнезе пары.
• Подготовка к применению методов репродуктивных технологий: инсеминации, ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов), ЭКО.

Подготовка к исследованию

Перед сбором материала необходимо не менее, чем 48-часовое, и не более, чем 7-дневное, воздержание. При проведении повторных исследований желательно устанавливать один и тот же период воздержания. В течение этого промежутка времени необходимо исключить приём алкогольных напитков, лекарственных препаратов (если это не угрожает жизни и здоровью клиента), воздействие повышенной температуры (посещение бани/сауны, производственная гипертермия, лихорадочные состояния), ультразвукового излучения. В день, предшествующий выполнению анализа, желательно исключить тяжелые физические и психологические нагрузки.

Факторы, влияющие на результат:

Половое воздержание менее 48 часов и более 7 суток; тепловое воздействие ( бани, сауны, гипертермия); физические нагрузки; обильные гнойные выделения из уретры

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Для интерпретации результатов исследования – обращайтесь к своему лечащему врачу

Правила взятия:

• Перед сдачей материала следует помочиться.
• Эякулят собирается путём мастурбации в специальную стерильную посуду.
• Для получения корректных результатов исследования необходимо собрать весь полученный эякулят.

Где сдать анализ?

Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Москва >>

С этой услугой чаще всего заказывают

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

источник

TUNEL

Фрагментация ДНК спермограммы TUNEL-тест

После проведения анализа сперматозоидов требуется определить процесс фрагментации ДНК. У многих мужчин возникает вопрос, что такое фрагментация сперматозоида.

Фрагментация ДНК сперматозоида – это процесс, в результате которого производится нарушение целостности цепочек нуклеиновых генетических клеток, расположенных в сперматозоиде. Если разрывы ДНК спирали увеличиваются, что целостность генетической информации нарушается. Это приводит к уменьшению вероятности возникновения беременности.

Способ определения микроповреждений ДНК

Лишь в единичных случаях яйцеклетка способна устранить некоторые дефекты ДНК спирали сперматозоида. Вероятность восстановления структуры генетического материала посредством яйцеклетки зависит от следующих факторов:

• Какой именно характер разрушения ДНК цепи.
• Какой процент генетического материала находится в поврежденном состоянии.
• Насколько качественна яйцеклетка, ведь именно от этого зависит возможность убрать дефекты характерные для ДНК спирали сперматозоида. В этом случае особое внимание следует уделить возрасту пациентки.

Отметим, что существует вероятность того, что результаты от одного донора будут отличаться в зависимости от времени сдачи. Величина фрагментации ДНК, как правило, изменяется в течение недели или месяца.

Терапия по восстановлению фрагментации ДНК

Ученые доказали, что для минимизации фрагментации ДНК следует использовать антиоксиданты. При этом следует учесть тот факт, что такие терапевтические мероприятия не дают результат в том случае, если фрагментация стала следствием длительного воздействия на организм токсичных веществ или высокой температуры. Под воздействием этих факторов производится нарушение ферментов каспазы и белков эндонуклеазы сперматозоида.

Врачи рекомендуют в таком случае извлекать сперматозоиды прямо из яичек, тогда удается получить материал, в котором процесс фрагментации протекает медленнее. Таким образом, получается материал более высокого качества.

Спермограмма и тест на целостность структуры ДНК

Отметим, что спермограмма определяет совсем другие характеристики сперматозоидов не обращая внимание на цепочку ДНК. Спермограмма делает основной упор на исследование физических характеристик семенной жидкости, ее насыщенности, подвижности сперматозоидов и их строение. В результате такой процедуры не производится диагностирование генетической структуры.

Определение причин разрушения ДНК сперматозоидов

На формирование целостной структуры ДНК сперматозоидов влияют внутренние и внешние факторы. Внутренние заключаются в следующем:

• Неправильно произведенная отбраковка. Отметим, что сперматозоиды в организме мужчины образовываются в семенниках. Те из них, которые были произведены с нарушениями должны попасть в отбраковку. После этого организм самостоятельно выведет их. В некоторых случаях процесс дает сбой и в эякуляте содержится определенное количество сперматозоидов с поврежденной системой ДНК.
• Созревание сперматозоидов происходит в яичках. В результате должна произойти активация хроматина, который находится в ядре клетки. Таким образом клетка будет обеспечена лабильностью. Если процедура вызревания не прошла правильно, то ДНК сперматозоидов получает целый ряд повреждений.

Внешние факторы, которые влияют на фрагментацию ДНК сперматозоидов:

• Ген повреждается посредством облучения рентгеновскими лучами или химиотерапией.
• Варикозное расширение вен, которое производилось в семенном канате.
• У мужчины наблюдалась высокая температура тела.
• Организм долгое время подвергался внешнему термическому воздействию.
• Наличие острого воспалительного процесса в течение долгого времени.
• Проявление оксидативного пост-тестикулярного стресса. Когда сперматозоиды движутся по эпидидимию, то может произойти фрагментация их ДНК. Эту причиной служит высвобождение сперматозоидами свободных радикалов, оказывающих негативное воздействие на формирование структуры ДНК. Также раздражение каспаз и эндонуклеаз может произойти под воздействием высокой температуры или воздействия токсичных веществ на организм мужчины.

Методы определения фрагментации ДНК

Для определения фрагментации ДНК сперматозоидов существует множество методов, каждый из которых отличается определенной степенью правдоподобности. Большой популярностью пользуется TUNEL-тест. Его рекомендуют использовать многие специалисты, которые на протяжении долгого времени работают в этой области.

Давайте более детально разберемся в вопросе, как же производится непосредственно фрагментация ДНК в спермограмме. В эякулят добавляется специальное вещество, а затем производится тщательное исследование спермы под микроскопом. Целью данного исследования является подсчет количества здоровых сперматозоидов, а также тех, которые имеют фрагментацию ДНК. Их внешний вид значительно разниться, поэтому специалист сможет безошибочно различить их по определенным параметрам.

Результат анализа выдается в виде фото, на котором находится изображение сперматозоидов. Также важный критерий – это процентное соотношение здоровых клеток к тем, которые имеют ярко выраженную фрагментацию ДНК. Заключение может выдать только квалифицированный в данной области специалист. При этом производится соотношение здоровых клеток, к тем, которые имеют структурные повреждения. Следует отдельно провести сравнение с показателями, которые соответствуют норме.

Преимущества использования TUNEL-теста

Главный плюс проведения исследования заключается в том, что производится тщательное изучение дефрагментации материала, производятся SCSA и SCD тесты, которые покажут возможные нарушения в формировании структуры ДНК и аномальные формы. Следует отметить, что прогноз таких анализов практически не производится. Тест выполняется для определения показателей, которые характерны мужчине сегодня. Прогнозирование можно производить только на основе выбранного курса лечения. Отметим, что этим тестом была отмечена норма патологий в эякуляте мужчины. Она составляет пятнадцать процентов.

TUNEL-тест предполагает исследование клеток при взаимодействии с энзимом. Это вещество при проникновении в сперматозоид производит его окрашивание в определенный цвет. На сегодняшний день чаще всего используется метод светлого поля или окрашивание оболочки ярким, мерцающим цветом. Последний метод получил название флюоресценции.

Показания к назначению фрагментации ДНК сперматозоидов

Для проведения подобного тестирования следует предварительно получить назначения своего лечащего врача. Он предписывается только в строго определенной ситуации.

Были выявлены основные показатели, которые служат основанием для назначения TUNEL-теста:

• Подозрение мужчины в бесплодии. При этом основная причина остается неизвестной и может быть установлена только при детальном обследовании.
• Если уже были попытки искусственного оплодотворения, которые не дали положительного результата. Следует отметить, что назначение целесообразно только в случае наличия нескольких попыток.
• После зачатия было установлено, что эмбрион имеет невысокое качество. Посредством теста производится определение причины такого результата.
• В семенном канатике мужчины было обнаружено варикозное расширение вен, которое негативным образом влияет на состояние здоровья.
• Пациент находится в возрастной категории, которая больше чем сорок пять лет.
• С использование этого теста производится установление качества спермы, которая была заморожена. Образец пригоден к дальнейшему использованию только в том случае, если количество клеток с патологиями не превышает допустимую норму.
• У мужчины в течение более трех месяцев наблюдалась высокая температура тела.

Исследование фрагментации ДНК – сложная и кропотливая процедура, которая производится для определения возможных причин отсутствия оплодотворения. Используется по назначению врача в соответствии с регламентом и правилами процедуры. Несет исключительно информативный характер.

источник